Каковы функции иммуномагнитных шариков?
В последние годы иммуномагнитные шарики привлекают все больше внимания ученых, и их применение в области биомедицины становится все более и более обширным. Но на самом деле иммуномагнитные шарики — это не новые продукты, которые были разработаны совсем недавно. Уже в конце 1980-х годов он начал играть огромную роль в области разделения и обогащения клеток.
Иммуномагнитные шарики обычно обладают сверхсильным парамагнетизмом. В присутствии внешнего электрического поля иммуномагнитные шарики будут проявлять магнетизм и агрегироваться. После выхода из магнитного поля они могут равномерно диспергироваться, как обычные частицы. Поверхность иммуномагнитных шариков обычно имеет большое количество поверхностно-активных групп, и биологически активные молекулы могут адсорбироваться или связываться с ее поверхностью, чтобы реализовать их использование в сортировке клеток, разделении и экстракции нуклеиновых кислот, иммуноанализе, очистке биологических макромолекул и иммобилизации ферментов. и т.д. Приложения в нескольких областях.
Экстракция нуклеиновых кислот — одно из первых применений магнитных шариков, и этот метод не сильно изменился за десятилетия. Регулируя значение pH буфера, нуклеиновая кислота связывается с магнитными шариками посредством электростатической адсорбции. Затем, в условиях внешнего электрического поля, отработанная жидкость удаляется и промывается, и, наконец, может быть получен образец чистой нуклеиновой кислоты.
Метод магнитных шариков позволяет избежать таких этапов, как вакуумирование и высокоскоростное центрифугирование, и может уменьшить повреждение образца, вызванное внешними силами. Метод экстракции с помощью магнитных шариков прост в использовании, содержит простые реагенты и подходит для высокопроизводительных автоматизированных операций в 96-луночных или 384-луночных планшетах.
С развитием технологий все больше и больше производителей разрабатывают различные наборы для экстракции нуклеиновых кислот на основе иммуномагнитных шариков. Различные химические модификации на поверхности магнитных шариков позволяют проводить сложные эксперименты.
Сортировка ячеек
Сортировка клеток — еще одно популярное применение иммуномагнитных шариков. Используя иммуномагнитные шарики в сочетании с маркерами на поверхности клеток-мишеней, клетки-мишени высокой чистоты можно отделить от сложных смесей клеток в течение нескольких минут. Иммуномагнитные шарики не активируют клетки и не влияют на функцию и жизнеспособность клеток, а физиологические функции клеток не изменяются, поэтому клетки с магнитной меткой можно сразу использовать для анализа и последующих экспериментов.
Другой распространенный метод сортировки ячеек — FACS. В случае сортировки отдельных ячеек, сортировки нескольких ячеек одновременно или сортировки на основе внутриклеточных маркеров ячеек (таких как GFP) метод FACS является более предпочтительным. По сравнению с FACS, операция сортировки магнитных шариков проще и быстрее. Для общей сортировки клеток может быть предпочтительным метод иммуномагнитных шариков.
Разделение и очистка антител
Традиционное разделение и очистка антител обычно использует хроматографию, которая является громоздкой, требует много времени, требует большого количества оборудования и требует больших капиталовложений, в то время как магнитная очистка антител на основе иммуномагнитных шариков, покрытых белком, может обеспечить экспрессию продуктов моноклональных антител посредством простой магнитной адсорбции. Цель разделения моноклональных антител. По сравнению с традиционными методами разделения, иммуномагнитные шарики могут одновременно выполнять разделение и обогащение, что эффективно повышает скорость разделения и эффективность обогащения. Иммуномагнитные шарики могут также реализовывать автоматизацию и массовую работу, удовлетворять требованиям биологии к высокопроизводительным операциям и обладают такими характеристиками, как удобство использования, простота в эксплуатации, короткое время и низкая стоимость.
Стимуляция клеток
Иммуномагнитные шарики также играют важную роль в клеточной терапии. При активации и размножении Т-клеток и NK-клеток антитела или иммуномагнитные шарики, связанные с белками, могут заменять APC, что в определенной степени позволяет избежать утомительной операции клеточного процессинга. После завершения стимуляции и активации клеток иммунные магнитные шарики можно полностью удалить с помощью магнитного поля. По сравнению с прямым добавлением антител или белков для стимуляции предотвращается остаточное загрязнение растворимыми антителами или митогенами. Один и тот же иммуномагнитный шарик может быть связан с множеством необходимых антител и белков, а эффект близости может значительно оптимизировать эффект стимуляции клеток и повысить эффективность размножения клеток.
Диагностика in vitro
Использование иммуномагнитных шариков может сочетать характеристики целевых молекул, а методы их применения в диагностике in vitro также расширяются. Во-первых, иммуномагнитные шарики используются в качестве субстратов, которые можно использовать для захвата образцов. Поскольку магнитные шарики обладают хорошей текучестью и большой площадью поверхности, они могут полностью обнажить белок-лиганд и значительно повысить эффективность захвата. В то же время использование различных методов обнаружения, таких как флуоресценция, электрохимия или хемилюминесценция, также дает большую свободу при разработке методологии. Кроме того, иммуномагнитные шарики также можно использовать в качестве маркеров, а магнитные свойства магнитных шариков можно использовать для получения сигналов. Этот метод обычно имеет чрезвычайно высокую чувствительность, которая может достигать фг / мл.