Как выбрать правильную систему экстракции нуклеиновых кислот

Система экстракции нуклеиновых кислот — это инструмент, который автоматически завершает работу по экстракции нуклеиновых кислот из образцов, применяя соответствующие реагенты для экстракции нуклеиновых кислот. Он широко используется в различных областях, таких как Центр по контролю заболеваний, клиническая диагностика заболеваний, безопасность переливания крови, судебно-медицинская идентификация, микробиологические исследования окружающей среды, тестирование безопасности пищевых продуктов, животноводство и исследования молекулярной биологии.

Классификация систем экстракции нуклеиновых кислот

1. Разделены по размеру модели прибора.

1) Автоматическая жидкостная рабочая станция

Автоматическая рабочая станция для жидкостей — это очень мощное устройство, которое автоматически завершает дозирование и аспирацию жидкости и может даже реализовать полную автоматизацию экстракции, амплификации и обнаружения образцов за счет интеграции таких функций, как амплификация и обнаружение. Экстракция нуклеиновой кислоты — это только одно из ее функций, и она не подходит для рутинной лабораторной экстракции нуклеиновой кислоты. Обычно он применяется к экспериментальным потребностям одного типа образцов и очень большого количества образцов (по крайней мере, 96, как правило, несколько сотен) одновременно. Для создания платформы и эксплуатации автоматизированных рабочих мест требуются относительно большие средства.

2) Мелкомасштабная автоматическая система экстракции нуклеиновых кислот Небольшой автоматический прибор достигает цели автоматической экстракции нуклеиновых кислот благодаря особенностям операционной структуры и может использоваться в любой лаборатории.

2. Отличаются принципом экстракции.

1) Инструменты, использующие метод спин-колонки

Система экстракции нуклеиновых кислот методом центробежной колонки в основном использует комбинацию центрифуги и автоматического дозатора. Пропускная способность обычно составляет 1-12 проб. Время операции примерно такое же, как и при ручной экстракции. Это не улучшает реальную эффективность работы и стоит дорого. Различные модели Расходные материалы прибора не универсальны и подходят только для крупных лабораторий с достаточными средствами.

2) Инструменты с использованием метода магнитных шариков

Используя магнитные шарики в качестве носителя, используя принцип адсорбции магнитных шариков нуклеиновых кислот при высоких значениях соли и низких значениях pH и отделяя их от нуклеиновых кислот при низких значениях соли и высоких значениях pH, весь процесс экстракции и очистки нуклеиновых кислот осуществляется путем перемещения магнитные шарики или переносящая жидкость. Благодаря своему уникальному принципу, он может быть изготовлен из различных флюсов. Его можно извлечь из одной пробирки или 8-96 образцов, и его работа проста и быстра. Для извлечения 96 образцов требуется всего 30-45 минут, что значительно повышает эффективность эксперимента, а низкая стоимость позволяет использовать его в различных лабораториях. В настоящее время это основной инструмент на рынке.

Автоматическая система извлечения нуклеиновых кислот методом магнитных шариков делится на метод магнитного стержня и метод всасывания.

Позвольте мне сначала поговорить о методе отсасывания: как следует из названия, метод отсасывания осуществляется с помощью автоматического дозатора. Лизирующий раствор добавляется через автоматическое пипеточное устройство, и магнитные шарики адсорбируются; раствор для лизиса удаляется, раствор для промывки добавляется, магнитные шарики адсорбируются и промывка удаляется. Раствор, добавьте буфер для элюирования. Кажется, что нет никаких проблем с этапами, но самая большая проблема с методом всасывания заключается в том, что для того, чтобы не удалить магнитные шарики при удалении отработанной жидкости, пипетка не должна находиться слишком близко к магнитным шарикам, чтобы предотвратить магнитные шарики. и отработанная жидкость от всасывания. Всегда есть небольшая часть сточной жидкости, которую невозможно полностью удалить каждый раз, особенно устройство с магнитом внизу. Поскольку магнитные шарики притягиваются магнитом ко дну, пипетка не должна находиться слишком близко ко дну, чтобы промывочный раствор не мог быть полностью удален. Удаление остаточной соли и этанола в промывочном растворе повлияет на последующую эффективность элюирования и успешность ПЦР; магнит на боковой стороне устройства будет иметь меньше остаточной жидкости, но эффективность элюирования невысока, полагаясь на саморастворение ДНК для промывания в очищенном от буфера растворе, если вы не подождете более получаса, около 96 автоматических рабочих станций экстракции нуклеиновых кислот требуют 150 минут для одного цикла экстракции. В то же время для 32-магнитного метода можно использовать 5 раундов.

Давайте поговорим о системе экстракции нуклеиновых кислот методом магнитных стержней: поток обычно имеет 8, 16, 32, 96 каналов. По сравнению с методом всасывания преимущество метода магнитного стержня заключается в том, что жидкость на каждом этапе не остается, потому что магнитный стержень только забирает магнитные шарики и передает Go в соответствующие реакционные лунки на следующем этапе. Кроме того, система экстракции методом магнитных стержней должна иметь более полные функции, такие как нагрев, и каждый нагревательный резервуар должен иметь независимый контроль температуры, чтобы можно было настроить нагрев, пиролиз и элюирование. Различные температуры, еще один очень важный момент заключается в том, что двигатель, который приводит в движение магнитный стержень, должен иметь возможность приводить магнитный стержень в движение, чтобы быстро перемешивать и перемешивать жидкость, чтобы облегчить автоматизацию и облегчить лизис и тщательную промывку. Выбор магнитного потока методом магнитного стержня лучше всего составляет 32 канала. Кажется, что 96 каналов имеют более высокий поток, но есть очень практическая проблема. Когда 96 магнитных стержней переносятся с одной пластины на другую, магнитные стержни Что делать, если жидкость падает на полпути, она капает в другие отверстия и вызывает загрязнение, а 32-канальный магнитный стержень не проходит по небу над другими образцами , поэтому перекрестного заражения не будет.

Основной принцип системы извлечения нуклеиновых кислот с помощью магнитных шариков

1. Метод всасывания

1. Метод отсасывания, также называемый методом пипетирования, заключается в извлечении нуклеиновой кислоты путем фиксации магнитных шариков и переноса жидкости. Обычно операционная система управляет механическим рычагом, чтобы осуществить передачу. Процесс экстракции выглядит следующим образом:

1) Лизис: добавить раствор для лизиса к образцу, осуществить перемешивание и полную реакцию реакционного раствора посредством механического движения и нагревания, лизиса клеток и высвобождения нуклеиновой кислоты.

2) Адсорбция: добавьте магнитные шарики в раствор для лизирования образца и тщательно их перемешайте. Магнитные шарики обладают сильным сродством к нуклеиновым кислотам при высоких значениях соли и низких значениях pH для адсорбции нуклеиновых кислот. Под действием внешнего магнитного поля магнитные шарики отделяются от раствора. , Используйте наконечник для удаления жидкости и слейте ее в бак для отходов, а наконечник выбросите.

3) Промывка: удалите внешнее магнитное поле, замените наконечник новым, добавьте промывочный буферный раствор, тщательно перемешайте для удаления примесей и удалите жидкость под действием внешнего магнитного поля.

4) Элюция: удалите внешнее магнитное поле, замените наконечник новым, добавьте буфер для элюирования и тщательно перемешайте. Связанная нуклеиновая кислота отделяется от магнитных шариков для получения очищенной нуклеиновой кислоты.

2. Магнитно-стержневой метод.

Метод магнитного стержня реализует разделение нуклеиновых кислот путем фиксации жидкости и переноса магнитных шариков. Принцип и процесс такие же, как и у метода всасывания, но разница заключается в способе отделения магнитных шариков от жидкости. Метод магнитного стержня заключается в том, чтобы отделить магнитные шарики от отработанной жидкости посредством адсорбции магнитных шариков на магнитном стержне и поместить их в следующую жидкость, чтобы осуществить экстракцию нуклеиновой кислоты.

Особенности экстрактора нуклеиновых кислот методом магнитных гранул

1. Возможность реализовать автоматическую и высокопроизводительную работу.

2. Операция простая и быстрая.

3. Безопасность и охрана окружающей среды.

4. Высокая чистота и высокий выход.

5. Отсутствие загрязнения и стабильные результаты.

6. Низкая стоимость, удобство широкого применения.

7. Может обрабатывать разные типы образцов одновременно.

Меры предосторожности

1. Среда, в которой устанавливается прибор: нормальное атмосферное давление (высота должна быть ниже 3000 м), температура 20-35 ℃, типичная рабочая температура 25 ℃, относительная влажность 10% -80%, беспрепятственный поток воздуха 35 ℃ или ниже.

2. Избегайте размещения прибора рядом с источниками тепла, например, электронагревателями; в то же время, чтобы предотвратить короткое замыкание электронных компонентов, избегайте попадания на них воды или других жидкостей.

3. Отверстия для впуска и выпуска воздуха расположены на задней панели прибора, и в то же время не допускайте скопления пыли или волокон на впускном отверстии для воздуха, чтобы воздуховод не перекрывался.

4. Экстрактор нуклеиновой кислоты находится на расстоянии не менее 10 см от других вертикальных поверхностей.

5. Заземление прибора: во избежание поражения электрическим током входной шнур питания прибора должен быть заземлен.

6. Держитесь подальше от цепей под напряжением. Операторам не разрешается разбирать прибор без разрешения. Замена компонентов или внутренние регулировки должны выполняться квалифицированным профессиональным обслуживающим персоналом. Не заменяйте компоненты при включенном питании.