Introducción a todo el proceso de detección de ácidos nucleicos en laboratorio.
Desde agosto, la nueva epidemia de neumonía de la corona se ha convertido una vez más en lo «normal». Han aparecido epidemias de diversos grados y escalas en todo el mundo, y hay miles de nuevas muestras de ácido nucleico de la neumonía de la corona que esperan ser analizadas todos los días. ¿Cómo se detectan estas muestras en el laboratorio? ¿Cómo se ve el laboratorio P3 como el «primer campo de batalla» para que los humanos luchen contra el nuevo virus corona, y cuál es el proceso completo de pruebas de ácido nucleico?
Según el nivel de riesgo, incluida la infectividad y la nocividad de los patógenos infecciosos, los laboratorios biológicos se dividen en cuatro niveles: P1, P2, P3 y P4 en el mundo. El trabajo que puede realizar el laboratorio P1-4 también se divide según este nivel de seguridad, con el nivel estricto de menor a mayor. El laboratorio P3, también conocido como laboratorio de protección, es apto para procesamientos altamente peligrosos para el ser humano, los animales, las plantas o el medio ambiente, por contacto directo o aerosoles que pueden infectar a personas con enfermedades graves o incluso mortales, o altamente nocivas para animales, plantas y el medio ambiente Suelen existir medidas preventivas y terapéuticas para los factores patógenos.
¿Cómo se realizan las pruebas de ácido nucleico en el laboratorio?
Se puede dividir a grandes rasgos en: preparaciones previas a la prueba-comprobar la información de la muestra-inactivación de la muestra-abrir la tapa y añadir muestras y extracción de ácido nucleico-preparación del sistema de reacción de PCR-prueba de amplificación de ácido nucleico-finalización de la prueba-autoclave.
Antes de la prueba
Antes de abrir la muestra, el inspector debe usar equipo de protección personal, como ropa protectora, máscaras, gafas, pantallas faciales, guantes médicos de látex de doble capa y botas impermeables. Cada paso no debe salir mal.
Comprobación
1. Use alcohol al 75% para desinfectar la superficie exterior de la caja de entrega de muestras en el área central del laboratorio. Después de la desinfección, verifique el nombre, la edad, el sexo y otra información de la muestra analizada.
2. Ponga la muestra en un baño de agua durante media hora para inactivar la proteína del virus a una temperatura alta de 56 ℃, de modo que la proteína del virus pierda su actividad fisiológica y el virus pierda su capacidad de infectar, causar enfermedades y reproducirse sin que afecta a la secuencia genética de la proteína del virus. , Para garantizar la seguridad de la detección.
3. Cuando el experimentador obtiene la muestra inactivada, el primer paso es agitar, tratar de dejar que el virus del hisopo se eluya en la solución del medio, y el segundo paso es realizar 5 minutos de precipitación. La tercera parte es abrir la tapa y agregar muestras. Este paso debe realizarse manualmente y requiere un alto grado de cooperación entre dos personas. Una persona desenrosca la tapa del tanque de muestra y la otra usa una micropipeta para succionar una pequeña cantidad de solución en el tanque de muestra, la coloca en otro tubo de extracción y luego atornilla la tapa del tubo.
La extracción de ácidos nucleicos puede ser asistida por instrumentos, pero debido a la necesidad de comparación, a menudo se requieren operaciones manuales y se requieren más de 10 pasos, como centrifugación, adición de reactivos y lavado. Entre ellos, hay más de 7 operaciones que necesitan abrir la tapa del tubo, y se necesitan unos 50 minutos para completar una extracción de ácido nucleico artificial.
4. Salga del área de prueba central, comience la preparación del sistema de reacción de PCR y agregue el ácido nucleico viral extraído al reactivo de detección de amplificación de ácido nucleico.
5. Coloque la reacción de PCR preparada en la máquina de PCR cuantitativa fluorescente. Configure las condiciones de la reacción de PCR en la computadora, ejecute el instrumento e inicie la detección de amplificación de ácido nucleico.
Después de la prueba
El probador debe prestar atención a la situación de la prueba en tiempo real. Después de aproximadamente 1,5 horas, se completa la amplificación del ácido nucleico y se interpreta el resultado de la prueba. En este punto, se completa todo el proceso, alrededor de 4 horas.
El último y muy importante paso es esterilizar en autoclave los contaminantes. Una vez que los contaminantes producidos durante el experimento se esterilizan en autoclave, se tratan como desechos médicos ordinarios.
Se puede decir que el proceso de detección de ácidos nucleicos también es un proceso de carrera contra el tiempo. Especialmente en escenarios donde se requieren pruebas de ácido nucleico a gran escala, el transporte a un laboratorio designado para la prueba obviamente requiere un alto costo de tiempo. El uso de laboratorios móviles proporciona un método eficaz para mejorar la eficiencia de la detección de ácidos nucleicos.
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¿Cuál es el proceso de la prueba de ácido nucleico COVID-19?
¿Cómo mejorar la precisión de las pruebas de ácido nucleico COVID-19?
