Введение во весь процесс лабораторного обнаружения нуклеиновых кислот
С августа новая коронная эпидемия пневмонии снова стала «нормой». Эпидемии разной степени и масштабов возникли по всему миру, и каждый день тысячи новых образцов нуклеиновых кислот коронной пневмонии ждут своего часа. Как эти образцы обнаруживаются в лаборатории? Как выглядит лаборатория P3 как «первое поле битвы» для людей, сражающихся с новым коронным вирусом, и каков весь процесс тестирования нуклеиновых кислот?
По уровню риска, включая инфекционность и вредоносность инфекционных патогенов, биологические лаборатории делятся на четыре уровня: P1, P2, P3 и P4 в мире. Работа, которую может выполнять лаборатория P1-4, также делится в соответствии с этим уровнем безопасности, причем строгий уровень — от низкого до высокого. Лаборатория P3, также известная как лаборатория защиты, подходит для обработки очень опасных для людей, животных, растений или окружающей среды путем прямого контакта или аэрозолей, которые могут заразить людей серьезными или даже смертельными заболеваниями или очень опасны для животных, растений и Окружающая среда Обычно существуют профилактические и лечебные меры против патогенных факторов.
Как проводится тестирование нуклеиновых кислот в лаборатории?
Его можно условно разделить на: подготовка перед тестом — проверка информации об образце — инактивация образца — открытие крышки и добавление образцов и экстракция нуклеиновой кислоты — подготовка реакционной системы ПЦР — тестирование амплификации нуклеиновой кислоты — завершение теста — автоклав.
Перед тестированием
Перед вскрытием образца инспектор должен носить средства индивидуальной защиты, такие как защитная одежда, маски, защитные очки, защитные маски, двухслойные медицинские латексные перчатки и водонепроницаемая обувь. Каждый шаг не должен ошибиться.
Проверка
1. Используйте 75% спирт для дезинфекции внешней поверхности коробки для доставки образцов в основной зоне лаборатории. После дезинфекции проверьте имя, возраст, пол и другую информацию об исследуемом образце.
2. Поместите образец в водяную баню на полчаса, чтобы инактивировать вирусный белок при высокой температуре 56 ℃, чтобы вирусный белок потерял свою физиологическую активность, а вирус потерял способность инфицировать, вызывать болезни и воспроизводиться без влияющие на последовательность гена вирусного белка. , Для обеспечения безопасности обнаружения.
3. Когда экспериментатор получает инактивированный образец, первый шаг — встряхнуть, попытаться позволить вирусу на тампоне элюироваться в растворе среды, а второй шаг — провести 5 минут осаждения. Третья часть — открыть крышку и добавить образцы. Этот шаг должен выполняться вручную и требует высокой степени сотрудничества между двумя людьми. Один человек отвинчивает крышку резервуара для образца, а другой с помощью микропипетки набирает небольшое количество раствора в резервуар для образца, помещает его в другую пробирку для экстракции, а затем навинчивает крышку пробирки.
Экстракции нуклеиновой кислоты могут способствовать инструменты, но из-за необходимости сравнения часто требуются ручные операции и требуется повторение более 10 этапов, таких как центрифугирование, добавление реагентов и промывка. Среди них более 7 операций, при которых необходимо открывать крышку пробирки, а для завершения искусственной экстракции нуклеиновой кислоты требуется около 50 минут.
4. Выйдите из тестовой зоны ядра, запустите подготовку системы реакции ПЦР и добавьте извлеченную вирусную нуклеиновую кислоту к реагенту для обнаружения амплификации нуклеиновой кислоты.
5. Поместите подготовленную реакцию ПЦР на флуоресцентную количественную ПЦР-машину. Установите условия реакции ПЦР на компьютере, запустите прибор и запустите обнаружение амплификации нуклеиновых кислот.
После тестирования
Тестировщику необходимо обращать внимание на тестовую ситуацию в реальном времени. Примерно через 1,5 часа амплификация нуклеиновой кислоты завершается, и результат теста интерпретируется. На этом весь процесс завершен, около 4 часов.
Последний и очень важный шаг — автоклавирование загрязнителей. После автоклавирования загрязнителей, образующихся в ходе эксперимента, с ними обращаются как с обычными медицинскими отходами.
Можно сказать, что процесс обнаружения нуклеиновых кислот — это тоже процесс бега со временем. Очевидно, что транспортировка в назначенную лабораторию для тестирования требует больших временных затрат, особенно в сценариях, где требуется крупномасштабное тестирование нуклеиновых кислот. Использование мобильных лабораторий обеспечивает эффективный метод повышения эффективности обнаружения нуклеиновых кислот.
Для получения дополнительной информации о тестировании нуклеиновых кислот вируса COVID-19 нажмите здесь:
Как проходит тестирование нуклеиновой кислоты COVID-19?
Как повысить точность тестирования нуклеиновых кислот COVID-19?
