磁珠常见分类及其分离原理

随着提取技术的不断发展和完善,磁珠法提取技术不断在国内兴起,作为提取的核心材料,磁珠不断被人所熟知。磁珠是利用一定的组织包被四氧化三铁核心而形成的可以被磁铁吸附的同时有能通过表面包被物吸附(结合)核酸的神奇的小珠子。之所以说他神奇,是因为他的用途很大!它可以实现核酸提取的自动化和高通量化。那么他的家族有哪些成员呢?下面,爱森小编为大家分享一下磁珠常见分类及其分离原理吧。

一、磁珠的主要分类

1、硅胶质膜磁珠

这是市场上很早出现的一类核酸结合的磁珠,也是市面上使用广泛的磁珠之一。反应原理是高盐离子的条件下核酸和硅胶质膜靠正负电吸附力结合核酸,然后在低盐离子的环境中把核酸洗脱分离,达到核酸提取的目的。

2、氨基磁珠

氨基磁珠是在硅胶质膜磁珠的基础上,做了氨基基团的修饰,通过改变溶液的酸碱性,达到核酸与磁珠的结合与分离的效果,当然这种方法的PH值控制要相当的要求,不然会影响核酸的结合和洗脱效果。

3、羟基磁珠

羟基磁珠是在硅胶质膜磁珠的基础上,加入了羟基修饰基团,其原理与氨基磁珠类似。

4、醛基磁珠

硅胶质膜磁珠修饰醛基基团后,通过醛基基团结合特异性的引物,钓取特定核酸。但此类磁珠成本较高。另一种醛基磁珠的原理(无特异性引物修饰)与氨基、羟基的结合原理类似。

5、纤维素包被磁珠

纤维素包被磁珠是目前市面上的另一类磁珠,有别于硅胶质膜系列的磁珠,纤维素膜磁珠表面较为粗糙,相对表面积更大。其原理是利用纤维素膜的亲水性在疏水的环境中与亲水性的核酸结合,这种亲疏水性的结合力(共价键)强于正负电结合力(离子键)。

Nucleic Acid Extraction Carboxyl Magnetic Beads

二、磁珠分离核酸的原理

在纳米级磁珠表面修饰有对核酸有吸附作用的特定活性官能基团,通过使用不同的裂解液、结合液、洗涤液在特定的条件下能够与目的核酸进行特异性结合,同时利用磁珠自身的磁性,在外磁场的作用下可以方便的实现定向移动与富集,从而达到核酸与杂质分离的目的,进而实现对目标物质的分离纯化,获得纯化核酸。