Las perlas magnéticas son la herramienta principal de la nueva tecnología de extracción de ácidos nucleicos. Las perlas magnéticas tienen las características de monodispersidad, alta área de superficie específica, buena dispersabilidad y resuspensión, respuesta magnética más rápida, mejor solubilidad en agua y grupos funcionales más activos. Pueden formar un sistema de reacción «casi homogéneo». Puede combinarse, reaccionar y separarse con el fragmento objetivo con gran eficacia y especificidad. Bajo el control direccional (automatización) del magnetismo externo, la molécula objetivo puede separarse del complejo sistema biológico, suelo, agua y otras muestras mediante adsorción, limpieza, elución y otras operaciones. A continuación, compartiré con ustedes los tipos comunes de perlas magnéticas y sus perspectivas de desarrollo.

Tipos comunes de perlas magnéticas

1. Cuentas magnéticas sin modificar

El núcleo magnético es el grupo magnético Fe3O4, que primero se recubre con silano derivatizado y luego se recubre con polímero. En los primeros días, algunos fabricantes mezclaban directamente Fe3O4 y polímero, los trituraban y tamizaban, e incluso mezclaban polvo de Fe3O4 en las perlas durante el proceso de polimerización en emulsión. Sin embargo, las perlas magnéticas obtenidas por estos métodos tienen algunos problemas. Por ejemplo, la exposición al hierro (fuga magnética) afectará los resultados experimentales de los usuarios de ADN polimerasa. El hierro puede reducir la actividad de la polimerasa y afectar negativamente a muchas células. Para mejorar la estabilidad de las perlas magnéticas y ampliar sus campos de aplicación, los científicos agregan diferentes materiales a las perlas magnéticas en diferentes proporciones, como poliestireno, dióxido de cobalto (no paramagnético), agarosa, etc. En términos generales, se agrega una capa externa de polímero a la superficie de la perla magnética, o se agrega una capa externa relativamente estable, tal como sílice. El propósito del recubrimiento es proteger el núcleo interno del cordón paramagnético y evitar que se oxide; Además, estos materiales de revestimiento tienen buena biocompatibilidad y son fáciles de acoplar con varios grupos funcionales.

2. Cuentas magnéticas con ligandos específicos universales

Este tipo de perlas magnéticas captura un grupo de moléculas objetivo y es versátil. A menudo se utiliza para la extracción y purificación de ácidos nucleicos en la investigación científica y el diagnóstico molecular, y la purificación de productos amplificados por PCR; También se puede utilizar en plataformas de secuenciación de segunda generación de alto rendimiento, como el cribado de ADN de fragmentos romos del secuenciador Illumina, etc. En resumen, a través de diversas modificaciones químicas y reacciones químicas, cientos de perlas magnéticas de ligando específico de uso general con diferentes se pueden obtener funciones y los campos de aplicación son muy amplios. Puede usarse no solo para la purificación de ácidos nucleicos, sino también para la purificación de proteínas y polisacáridos y la detección de inmunoensayos. Además, este tipo de perlas magnéticas también se usa ampliamente en la tecnología química biomédica moderna y en la investigación para la detección y administración de macromoléculas bioquímicas y fármacos de moléculas pequeñas.

3. Cuentas magnéticas con grupos de reconocimiento específicos

Este tipo de perlas magnéticas puede enriquecer y separar las células diana, y también puede separar células híbridas mediante adsorción específica (usando perlas magnéticas con anticuerpos específicos contra células no diana); en algunos experimentos específicos, como positivo en sistemas de clonación molecular Para la separación celular, el vector codifica la proteína marcadora de la superficie celular, y las células transfectadas con éxito se pueden separar usando perlas magnéticas acopladas con anticuerpos específicos (para la proteína marcadora de la superficie celular expresada por el vector).

Las perspectivas de desarrollo de las perlas magnéticas

En los últimos años, las perlas magnéticas se han aplicado gradualmente en campos como la biomedicina, la citología y la bioingeniería. Sin embargo, las perlas magnéticas y las series de perlas magnéticas producidas por empresas extranjeras todavía tienen una gran ventaja en el mercado de aplicaciones. Comenzó tarde en China, pero en los últimos años también han surgido varias empresas de alta calidad para producir productos de cuentas magnéticas, como Aisen Biotech. La tecnología de purificación y separación magnética de alta sensibilidad, alto rendimiento y alta eficiencia ha mostrado amplias perspectivas de aplicación en los mercados de biomedicina y diagnóstico clínico. La enorme demanda del mercado conducirá inevitablemente a las empresas nacionales a desarrollar y producir productos de perlas magnéticas de clase mundial. ¡Esperemos y veremos!

Los tipos comunes y las perspectivas de desarrollo de perlas magnéticas se presentan generalmente como se describió anteriormente. Aisen Biotechnology produce productos de extracción de ácidos nucleicos con perlas nanobiomagnéticas como núcleo. Si tiene necesidades relevantes, llame para una consulta.

El sistema de extracción de ácidos nucleicos es un sistema biomédico diseñado para la extracción automática de ácidos nucleicos mediante el método de perlas magnéticas. Solo necesita agregar la muestra que se extraerá al kit correspondiente, colocar el kit en el sistema de extracción, ejecutar el programa editado que viene con el sistema y completar una ronda de extracción de ácido nucleico de muestra en 15 a 30 minutos. El uso del sistema de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas se divide generalmente en dos tipos: método de succión y método de varilla magnética.

UNA. Las características del método de perlas magnéticas del sistema de extracción de ácidos nucleicos.

1. Capaz de realizar operaciones de automatización y alto rendimiento.
2. La operación es simple y rápida.
3. Seguridad y protección del medio ambiente.
4. Alta pureza y alto rendimiento.
5. Sin contaminación y resultados estables.
6. Bajo costo, conveniente para una amplia aplicación.

DOS. Utilice el método del sistema de extracción de ácido nucleico del método de perlas magnéticas

1. Método de succión

También llamado método de pipeteo, la extracción de ácido nucleico se logra inmovilizando perlas magnéticas y transfiriendo líquido. Generalmente, la transferencia se logra controlando el brazo mecánico a través del sistema operativo. El proceso de extracción es el siguiente:

① Lisis: agregue la solución de lisis a la muestra, realice la mezcla y reacción completa de la solución de reacción a través del movimiento mecánico y calentamiento, lisis celular y liberación de ácido nucleico.

②Adsorción: agregue perlas magnéticas a la solución de lisis de muestra y mézclelas bien. Las perlas magnéticas tienen una fuerte afinidad por los ácidos nucleicos con valores altos de sal y bajos valores de pH para adsorber los ácidos nucleicos. Bajo la acción de un campo magnético externo, las perlas magnéticas se separan de la solución. Utilice la punta para eliminar el líquido y deséchelo en el tanque de desechos, y deseche la punta.

③Lavado: Retire el campo magnético externo, reemplácelo con una punta nueva, agregue la solución tampón de lavado, mezcle bien para eliminar las impurezas y elimine el líquido bajo la acción del campo magnético externo.

④ Elución: Retire el campo magnético externo, reemplácelo con una punta nueva, agregue tampón de elución, mezcle bien y el ácido nucleico unido se separará de las perlas magnéticas para obtener ácido nucleico purificado.

2. Método de varilla magnética

El método de varilla magnética realiza la separación de ácidos nucleicos fijando el líquido y transfiriendo las perlas magnéticas. El principio y el proceso son los mismos que los del método de succión, pero la diferencia es el método de separar las perlas magnéticas y el líquido. El método de la varilla magnética consiste en separar las perlas magnéticas del líquido de desecho mediante la adsorción de las perlas magnéticas en la varilla magnética y colocarlas en el siguiente líquido para realizar la extracción de ácido nucleico.

TRES. Precauciones para el uso del sistema de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas

1. El entorno de instalación del sistema: presión atmosférica normal (la altitud debe ser inferior a 3000 m), temperatura de 20 a 35 ℃, temperatura de uso típica de 25 ℃, humedad relativa del 10% al 80%, flujo de aire sin obstrucciones de 35 below o inferior.
2. Evite colocar el sistema cerca de una fuente de calor, como un calentador eléctrico; al mismo tiempo, para evitar cortocircuitos de los componentes electrónicos, evite que salpique agua u otros líquidos.
3. La entrada de aire y la ventilación de escape están ubicadas en la parte posterior del sistema, evitando que el polvo o las fibras se acumulen en la entrada de aire y manteniendo el conducto de aire sin obstrucciones.
4. El sistema de extracción de ácido nucleico está al menos a 10 cm de otras superficies verticales,
5. Conexión a tierra del dispositivo del sistema: para evitar accidentes por descargas eléctricas, el cable de alimentación de entrada del dispositivo del sistema debe estar conectado a tierra.
6. Manténgase alejado de circuitos activos: los operadores no pueden desmontar el sistema sin autorización. El reemplazo de componentes o los ajustes internos deben ser realizados por personal de mantenimiento profesional calificado. No reemplace componentes cuando la alimentación esté encendida.

En la actualidad, el sistema de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas se usa ampliamente en varios campos, como pruebas microbianas ambientales, pruebas de seguridad alimentaria, seguridad de transfusiones de sangre, identificación de medicina forense, centros de control de enfermedades, diagnóstico clínico de enfermedades, investigación biológica y cría de animales.

Las perlas magnéticas juegan un papel importante en la extracción de ácidos nucleicos. El proceso específico es primero lisar las células, luego combinar ácidos nucleicos con perlas magnéticas a través de la solución de unión y usar la solución de lavado para eliminar los iones de sal y proteínas residuales, y luego combinar los ácidos nucleicos y las perlas magnéticas. Separar. Viendo que el proceso es muy sencillo, en realidad hay muchos factores que influyen en él. A continuación, te contaré cuáles son los factores que inciden en la extracción de perlas magnéticas.

1. La capacidad de unión de perlas magnéticas y ácido nucleico.

La máxima prioridad del método de perlas magnéticas para la extracción de ácidos nucleicos es la capacidad de adsorción de las perlas magnéticas y el ácido nucleico, lo que afecta directamente el rendimiento de la extracción de ácidos nucleicos. Para mejorar el rendimiento de las perlas magnéticas para unir ácidos nucleicos, varios fabricantes de perlas magnéticas han probado varios métodos, pero no hay más de dos tipos de perlas magnéticas en el mercado: perlas magnéticas de enlace iónico y perlas magnéticas de enlace covalente. Las perlas magnéticas unidas por iones están representadas por perlas magnéticas a base de gel de sílice. Este tipo de perlas magnéticas se debe cada vez más a sus fabricantes, y hay un sinfín de kits en el mercado, pero los principios son similares. El otro tipo de perlas magnéticas unidas covalentemente son las perlas magnéticas de membrana de celulosa. Ambos tipos de perlas magnéticas cubren la mayoría de los campos de la extracción de ácidos nucleicos: medicina, investigación científica, estación de sangre, control de enfermedades, forense y otros campos. Los productos también incluyen extracción de ADN / ARN de sangre completa, plantas, tejidos animales, saliva, células, bacterias, virus y otras muestras.

2. La fuerza magnética en la superficie de las perlas magnéticas.

La fuerza magnética en la superficie de las perlas magnéticas también es uno de los factores que afectan la extracción de ácidos nucleicos. No importa qué tan fuertes sean las perlas magnéticas para la unión del ácido nucleico, si el imán tiene una capacidad de adsorción limitada, muchas perlas magnéticas se perderán durante el funcionamiento y el ácido nucleico se perderá indirectamente. Debido a la naturaleza especial de la película de celulosa, su capacidad para proteger las propiedades magnéticas es pobre, por lo que la fuerza magnética en la superficie de las perlas magnéticas de la película de celulosa es más fuerte y es más fácil de adsorber cerca del soporte magnético.

3. Modo de funcionamiento del equipo

En la actualidad, existen dos tipos principales de equipos de automatización: el método de varilla magnética y el método de succión. El método de succión, también llamado método de pipeteo, consiste en lograr la extracción de ácido nucleico fijando perlas magnéticas y transfiriendo líquido. Generalmente, el sistema operativo controla el brazo robótico para lograr la transferencia, y la extracción de ácido nucleico se logra mediante lisis-adsorción-lavado-elución; varilla magnética El método consiste en realizar la separación del ácido nucleico fijando el líquido y transfiriendo las perlas magnéticas. El principio y el proceso son los mismos que los del método de succión, pero la diferencia es el método de separar las perlas magnéticas y el líquido. El método de la varilla magnética consiste en separar las perlas magnéticas del líquido de desecho mediante la adsorción de las perlas magnéticas en la varilla magnética y colocarlas en el siguiente líquido para realizar la extracción de ácido nucleico.

Los principales factores que afectan la extracción de perlas magnéticas son los tres tipos anteriores. Puede consultarlos al elegir cuentas magnéticas para asegurarse de que las cuentas magnéticas se utilicen bien. Las perlas magnéticas producidas por Aisen Biotechnology son de excelente calidad y rendimiento sobresaliente. Son muy útiles en la extracción de ácidos nucleicos. Pueden unir la sustancia objetivo en poco tiempo y evitar lesiones accidentales en el cuerpo humano. Los clientes que lo necesiten pueden llamar para realizar consultas.

Sabemos que la detección rápida y el muestreo del ácido nucleico de la neocorona humana se realiza principalmente a través de hisopos nasofaríngeos o hisopos orofaríngeos. Entonces, ¿cómo hacer una detección rápida de un nuevo ácido nucleico corona para alimentos congelados? De hecho, la detección rápida de COVID-19 para alimentos es similar a la detección rápida de COVID-19 humano. A continuación, echemos un vistazo a la ciencia popular:

1. Recogida de muestras de marisco, pescado y agua

Primero abra las branquias de la muestra de pescado, tome un hisopo de muestreo, limpie 5-10 veces en las branquias, luego coloque el cabezal del hisopo de muestreo en el tubo de recolección que contiene la solución de conservación, rompa el mango y luego séllelo para su inspección. ; Guarde la muestra de agua helada del pescado, use una pajita de plástico desechable para succionar 3-5 ml en un tubo de conservación de 5 ml y luego séllelo para su inspección.

2. Alimentos congelados para análisis de ácidos nucleicos

Para la detección rápida de COVID-19 en alimentos congelados, se debe dar prioridad a la recolección de tejidos con órganos evidentemente enfermos; en segundo lugar, se debe dar prioridad a los productos acuáticos a las muestras con órganos internos y tejidos circundantes; nuevamente, el mismo animal debe recolectarse en el orden de los tipos de muestra enumerados en la tabla anterior. El hisopo debe aplicarse al mismo tiempo. No se pueden recolectar más de 3 muestras del mismo animal; finalmente, se recolectan dos muestras para cada muestra, una para prueba y otra para respaldo.

Además de aplicar un hisopo sobre la superficie del alimento, también es necesario homogeneizar el tejido (la homogeneización también se denomina homogeneización, que es un proceso de micronización y homogeneización de la dispersión en el sistema de suspensión (o emulsión). Este tratamiento reduce simultáneamente el tamaño de la dispersión y mejora la uniformidad de la dispersión), y luego realiza la detección rápida normal del nuevo ácido nucleico del coronavirus, es decir, preparación de reactivos, extracción de ácido nucleico, detección de amplificación y emisión de informes.

3. Muestreo de la superficie del objeto

Principalmente tablas de cortar, cuchillos, verduras, carne, etc. Primero tome un hisopo de muestreo, después de remojarlo en la solución de conservación (si la superficie del objeto está mojada, puede tomar una muestra directamente), límpielo horizontal y verticalmente en la superficie de el objeto 5 veces y luego coloque el cabezal del hisopo de muestreo en el tubo de recolección que contiene la solución de conservación. El mango se rompe y luego se sella y se envía para su inspección.

En la actualidad, la mayoría de las epidemias esporádicas en muchos lugares son causadas por alimentos de la cadena de frío, por lo que también debe concederse gran importancia a la detección rápida de nuevos ácidos nucleicos corona en los alimentos de la cadena de frío. Es necesario seguir estrictamente las especificaciones de muestreo y muestrear cuidadosamente los alimentos y el medio ambiente que pueden estar contaminados. La detección rápida y el muestreo de nuevos ácidos nucleicos corona se llevan a cabo principalmente para varios tipos de alimentos congelados, envases de alimentos, suministros relacionados y personal relacionado, con el fin de lograr una investigación exhaustiva, sin dejar callejones sin salida.

Hay muchos tipos de kits de extracción de ácido nucleico. Hoy, presentaremos principalmente el principio, el método de uso y los pasos específicos del kit de extracción de ácido nucleico del método de perlas magnéticas.

Que es el acido nucleico
Los ácidos nucleicos están ampliamente presentes en todos los animales, células vegetales y microorganismos. Los ácidos nucleicos en los organismos a menudo se combinan con proteínas para formar nucleoproteínas.

Según la composición química diferente, el ácido nucleico se puede dividir en ácido ribonucleico, denominado ARN y ácido desoxirribonucleico, denominado ADN. El ADN es la base material principal para almacenar, copiar y transmitir información genética. El ARN juega un papel importante en el proceso de síntesis de proteínas, entre las que se transfieren el ácido ribonucleico, tRNA para abreviar. Desempeña el papel de transportar y transferir aminoácidos activados; El ácido ribonucleico mensajero, denominado ARNm, es la plantilla para la síntesis de proteínas. El ácido ribonucleico ribosómico, rRNA para abreviar, es el lugar principal donde las células sintetizan proteínas.

¿Qué es el kit de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas?
El kit de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas utiliza una separación única de perlas magnéticas y un sistema tampón para separar y purificar el ADN genómico de alta calidad de la muestra. Las perlas magnéticas con recubrimiento especial tienen una fuerte afinidad por el ADN diana en determinadas condiciones. Y cuando las condiciones cambian, las perlas magnéticas liberan el ADN adsorbido, lo que puede lograr el propósito de una rápida separación y purificación del ADN. Todo el proceso no involucra reactivos tóxicos, es seguro, conveniente y el ADN extraído es de alta pureza. El ADN genómico (OD260-0D320 / (0D280-0D320) purificado por este kit está entre 1,7 y 2,0, que se puede aplicar a varios experimentos de biología molecular posteriores.

El kit de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas utiliza una separación única de perlas magnéticas y un sistema tampón para separar y purificar el ADN genómico de alta calidad de la muestra. Las perlas magnéticas con recubrimiento especial tienen una fuerte afinidad por el ADN diana en determinadas condiciones. Y cuando las condiciones cambian, las perlas magnéticas liberan el ADN adsorbido, lo que puede lograr el propósito de una rápida separación y purificación del ADN. Todo el proceso no involucra reactivos tóxicos, es seguro, conveniente y el ADN extraído es de alta pureza. El ADN genómico (OD260-0D320 / (0D280-0D320) purificado por este kit está entre 1,7 y 2,0, que se puede aplicar a varios experimentos de biología molecular posteriores.

Kit de extracción contable: kit de extracción de ADN, kit de extracción de ARN

Composición: Solución de lisis, solución aglutinante, solución de lavado, eluyente, perlas biomagnéticas, instrucciones

Utilice los pasos del kit de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas:
Agregue Tampón C1, adsorbente tardío húmico C2 y perlas de vidrio a la muestra de suelo y agite en el vórtex.
Agregue BufferC3 para lisar las células
Agregue Buffer C4 para deformar y precipitar la proteína
Gaoxin elimina impurezas como el ácido húmico de gran tamaño.
Agregue BufferC 5. Etanol para ajustar las condiciones de unión.
Transferir a una columna de separación y centrifugar para adsorber el ADN.
Agregue líquido de lavado para lavar y eliminar impurezas como la sal.
Centrifugar durante 1 minuto para centrifugar el escudo base
Agregue TE y centrifugue durante 1 minuto para eluir el ADN
ADN de alta calidad
Lo anterior es la introducción relevante del kit de extracción de ácido nucleico del método de perlas magnéticas, que incluye la clasificación, composición y los pasos del método de uso específico del kit de extracción de ácido nucleico.