¿Cuáles son los métodos de extracción de ácidos nucleicos?

El principio de extracción de ácidos nucleicos garantiza, en primer lugar, la integridad de la estructura primaria del ácido nucleico y, en segundo lugar, elimina la contaminación de otras moléculas. Al extraer, se debe prestar atención a acortar el tiempo de extracción, reducir la degradación del ácido nucleico por factores químicos y físicos, fuerza de cizallamiento mecánico y alta temperatura, y prevenir la degradación biológica del ácido nucleico. ¿Cuáles son los métodos de extracción de ácidos nucleicos?

1.Método de sal concentrada
(1). Usando la diferente solubilidad de RNP y DNP en la solución electrolítica para separar los dos, el método común es extraer el moco de DNP obtenido extrayendo cloruro de sodio con cloruro de sodio 1M y agitando junto con cloroformo que contiene una pequeña cantidad de octanol para hacer la emulsificación. y centrifugación para eliminar la proteína. En este momento, el gel de proteína permanece entre la fase de agua y la fase de cloroformo, mientras que el ADN está en la fase de agua superior. La sal sódica del ADN se puede precipitar con 2 veces el volumen de etanol al 95%.

(2). También puede usar 0.15 M NaCL para lavar repetidamente la solución de trituración celular para eliminar el RNP, luego extraer la desoxirribonucleína con 1 M NaCL y luego eliminar la proteína mediante el método del cloroformo — isoalcohol. Comparando estos dos métodos, el segundo método puede reducir la degradación del ácido nucleico.

(3). Cuando se extrae ADN con una solución diluida de ácido clorhídrico, agregar una cantidad adecuada de detergente, como SDS, puede ayudar a separar las proteínas y el ADN. En el proceso de extracción, para inhibir la degradación del ADN por la DNasa en el tejido, se agregó citrato de sodio a la solución de cloruro de sodio como agente de fusión de iones metálicos, generalmente NaCL 15 M, citrato de sodio 0.015 M, y se llama solución SSC, para extraer ADN.

2.Método de detergente aniónico
Los detergentes como el SDS o el xilato de sodio se utilizan para desnaturalizar las proteínas y el ADN se puede extraer directamente de los materiales biológicos. Debido a que el ADN y las proteínas en las células a menudo se combinan por atracción electrostática o enlaces de coordinación, los detergentes aniónicos pueden destruirlos. Una especie de enlace de valencia, por lo que los detergentes aniónicos se utilizan a menudo para extraer ADN.

3.Método de extracción de fenol
El fenol actúa como desnaturalizante de proteínas y al mismo tiempo inhibe la degradación de la ADNasa. Cuando el homogeneizado se trata con fenol, el enlace entre la proteína y el ADN se rompe y la superficie de la molécula de proteína contiene muchos grupos polares que son compatibles con el fenol, y la molécula de proteína es soluble en fenol. Fase, mientras que el ADN es soluble en la fase acuosa. Después de la centrifugación y la estratificación, retire la capa de agua, repita la operación varias veces y luego combine la fase acuosa que contiene ADN y use la propiedad insoluble en alcohol del ácido nucleico para precipitar el ADN con etanol. En este momento, el ADN es una sustancia muy viscosa y se puede extraer envolviéndolo en una bola con vidrio. La característica de este método es mantener el ADN extraído en su estado natural.

4. método de extracción de agua
Utilizando la naturaleza del ácido nucleico para disolverse en agua, después de romper las células de los tejidos, elimine el ARN con una solución baja en sal y disuelva el precipitado en agua para disolver completamente el ADN en agua. Después de la centrifugación, recoja el sobrenadante y agregue cloruro de sodio sólido al sobrenadante. A 2,6 M, agregue 2 veces el volumen de etanol al 95%, agite inmediatamente y luego lave con etanol y acetona al 66%, 80% y 95%, respectivamente.

Lo anterior da una breve introducción a cuáles son los métodos de extracción de ácidos nucleicos. Ascend ofrece servicios de fundición profesionales y completos para productos de extracción de ácidos nucleicos.

método de aislamiento y purificación de ácidos nucleicos

El ácido nucleico es un importante portador de información genética y una importante molécula de información biológica. Desempeña un papel clave en el proceso de investigación biológica de las personas. En la actualidad, existen muchos métodos para el aislamiento y purificación de ácidos nucleicos. El más utilizado es el tiocianato de (iso) guanidina. ¿Cuál es el método de fenol-cloroformo en un solo paso? Este método se presenta brevemente a continuación.

Debido a la influencia de la ARNasa, para obtener una molécula de ARN completa, es necesario inactivar la actividad de la ARNasa intracelular lo más rápido posible en la etapa inicial de aislamiento y purificación de ácidos nucleicos. Bajo el efecto sinérgico del β-mercapto Z. alcohol, el tiocianato de (iso) guanidina de alta concentración puede inhibir la actividad de la ARNasa de manera extremadamente rápida y puede aislar moléculas completas de ARN del páncreas y otras células de tejido ricas en ARNasa. reactivo usado. Para muestras con menor contenido, agregar glucógeno puede aumentar la tasa de recuperación de ARN. El método de un solo paso se usa con mayor frecuencia en la extracción de ARN total.

1, Método de un solo paso con tiocianato de (iso) guanidina y cloroformo
El método de (iso) guanidina tiocianato-fenol cloroformo es un método clásico de un solo paso, propuesto por Chomczynski y Sacchi en 1987. Se lisan las células con una solución desnaturalizante que contiene 4 mmol / L de tiocianato de (iso) guanidina y 0,1 mmol / L de β- mercaptoetanol, luego se extrae la solución de lisis con fenol / cloroformo en condiciones ácidas de pH 4.0, y finalmente se prepara ARN por precipitación con isopropanol y lavado con etanol al 75%. En comparación con el método anterior de ultracentrifugación de tiocianato de (iso) guanidina-CsCl, este método es simple, económico y eficiente, y puede manejar múltiples al mismo tiempo. Las muestras y la integridad y pureza del ARN son altas. Todavía se usa para el aislamiento y purificación de ácidos nucleicos de células cultivadas y la mayoría de tejidos animales.

El rendimiento de ARN total depende de la cantidad inicial de la muestra. El rendimiento de ARN total por miligramo de tejido es de aproximadamente 4-7 gy aproximadamente 5-10 g por 106 células. Sin embargo, este método no es adecuado para extraer ARN del tejido adiposo rico en triglicéridos y, en ocasiones, el ARN se contaminará con polisacáridos y proteoglicanos. Estas contaminaciones afectarán la disolución del ARN después de la precipitación con etanol, mientras que inhiben la reacción de RT-PCR. Afecta al paso de transferencia en la hibridación del ARN al unirse a la membrana. La extracción de ARN del tejido adiposo se puede reemplazar por el método de ultracentrifugación de tiocianato de (iso) guanidina-CsC1. Cuando la contaminación de polisacáridos y proteoglicanos es grave, el siguiente método puede eliminarse agregando un paso de extracción con solvente orgánico y cambiando las condiciones de precipitación del ARN.

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2, método de un solo paso que puede preparar ARN, ADN y proteínas al mismo tiempo
Este método es un método mejorado del método de un solo paso con tiocianato de (iso) guanidina y cloroformo de fenol. Utiliza reactivo de lisis monofásico tiocianato-fenol de (iso) guanidina para lisar las células, y luego se agrega cloroformo para formar dos fases. El ADN y la proteína desnaturalizados se encuentran en la interfaz de las dos fases, y el ARN retenido en la fase acuosa superior se prepara mediante precipitación con isopropanol y lavado con alcohol Z al 75% en la solución de precipitación de ARN. La composición de la solución de precipitación de ARN es 1,2 mmol / L de NaCl y 0,8 mmol / L de citrato disódico.

Debido al uso de la solución de precipitación de ARN, las muestras de ARN preparadas por este método rara vez están contaminadas con polisacáridos y proteoglicanos, y pueden usarse para purificación de ARNm, hibridación Northern, transcripción inversa y reacciones RT-PCR. El ADN y la proteína en la interfaz se pueden precipitar por separado con etanol e isopropanol. El ADN preparado mediante este método tiene un tamaño de aproximadamente 20 kb y se puede utilizar como plantilla para reacciones de PCR, mientras que las muestras de proteínas se utilizan principalmente para transferencia Western. En la actualidad, este método tiene una variedad de reactivos de lisis monofásicos disponibles comercialmente para elegir. Es el método más comúnmente utilizado para la extracción de ARN total, y su rendimiento es equivalente al método de un solo paso con tiocianato de (iso) guanidina-fenol cloroformo.

3, otros métodos
El aislamiento y la purificación de ácidos nucleicos son numerosos, como el método de LiC1-urea, el método de ultracentrifugación de tiocianato de (iso) guanidina-CsCl, el método de fenol térmico, el método de clorhidrato de guanidina-disolvente orgánico, etc., que ahora rara vez se utilizan debido a varias razones.

En la actualidad, Ascend ha formado un programa profesional de purificación automática de ácidos nucleicos que cubre una variedad de muestras biológicas.

Clasificación de perlas magnéticas de extracción de ácido nucleico

Con el brote del nuevo coronavirus, aunque se ha controlado, todavía no todos pueden tomarlo a la ligera. Todos deben saber que todos los casos sospechosos y los pacientes con fiebre deben someterse a pruebas de ácido nucleico para confirmar si son nuevos coronavirus. Los pasos de la detección de ácidos nucleicos se dividen principalmente en tres pasos:
1. Muestreo: Recoja muestras que puedan contener virus del tracto respiratorio u otras partes del cuerpo humano.
2. Extracción: extraer el ácido nucleico viral de la muestra y separarlo de otras sustancias.
3. Detección: Detecte el contenido de virus extraído mediante el método de PCR cuantitativa de fluorescencia.
Entre ellos, las perlas magnéticas son una de las herramientas necesarias para la extracción de ácidos nucleicos. Entonces, ¿cuáles son la clasificación y las funciones de las perlas magnéticas para la extracción de ácidos nucleicos?
Clasificación y función de las perlas magnéticas: según las propiedades de la superficie, se pueden dividir en las siguientes tres categorías

1. Cuentas magnéticas hidroxi de silicona
Esta es una de las perlas magnéticas más utilizadas. Cuando se utilizan perlas magnéticas de silanol para extraer ácidos nucleicos, generalmente se requieren altas concentraciones de sales caotrópicas (NaI, NaClO4, GuHCI, GuSCN, etc.). La alta concentración de iones de sal puede proteger eficazmente la repulsión electrostática en la solución. Al mismo tiempo, los iones de sales caotrópicas también pueden combinarse competitivamente con la superficie de perlas magnéticas y moléculas de ácido nucleico, destruir la capa de hidratación original en ambas superficies y promover la adsorción (enlace de hidrógeno + fuerza de van der Waals) entre la superficie de perlas y moléculas de ácido nucleico. Dado que las sales caotrópicas comúnmente utilizadas, como los iones de guanidina, tienen un efecto inhibidor sobre la PCR, deben eliminarse en los siguientes pasos de lavado. El efecto de eliminación se puede controlar mediante la relación de absorbancia.


2. Cuentas magnéticas de carboxi
Además de poder unir moléculas de ácido nucleico en un entorno de sal caotrópica de alta concentración, tales perlas magnéticas pueden unir moléculas de ácido nucleico a través de otro mecanismo especial. Al agregar una cierta concentración de PEG y NaCl a la solución, las moléculas de ácido nucleico pueden curvarse gradualmente desde la conformación estirada a una forma de bola pequeña, y la mayoría de las cargas negativas también están protegidas, lo que promueve la adsorción del nucleico. moléculas de ácido a las perlas magnéticas. Cuanto mayor sea el peso molecular de la molécula de ácido nucleico, más probable será que se produzca este cambio conformacional de la espiral estirada a la bola enrollada. Por lo tanto, ajustando la relación de volumen de la solución salina a la muestra de ácido nucleico, es posible lograr un fragmento de ácido nucleico de mayor peso molecular en las perlas magnéticas de carboxilo. La adsorción preferencial en la superficie consigue el llamado efecto de cribado de fragmentos.

3. Amino / imidazolilo y otras perlas magnéticas cargadas positivamente
Tales perlas magnéticas pueden realizar fácilmente la unión reversible de moléculas de ácido nucleico en la superficie ajustando el pH. Sin embargo, debido a que la superficie cargada positivamente adsorbe las moléculas de ácido nucleico con demasiada fuerza, es fácil hacer que el rendimiento sea bajo. Por lo tanto, el uso de perlas magnéticas cargadas positivamente no está tan extendido como las perlas magnéticas de silanol y carboxilo.
La clasificación y función de las perlas magnéticas para la extracción de ácidos nucleicos se explican en detalle anteriormente. Aisen utiliza perlas nanobiomagnéticas como núcleo para producir extractores de ácido nucleico y sus kits de extracción de ácido nucleico de perlas magnéticas correspondientes.

¿Cuáles son los principios de la extracción y purificación de ácidos nucleicos?

La extracción de ácidos nucleicos se utiliza en pruebas y diagnósticos bioquímicos moleculares y es el primer paso de la clonación, transformación, digestión enzimática, transcripción in vitro, amplificación y secuenciación. Sin embargo, debido a la gran cantidad de proteínas, carbohidratos, metabolitos y otros contaminantes en la muestra original, no es fácil extraer ácidos nucleicos de alta calidad, es necesario aplicar el sistema de extracción de ácidos nucleicos de apoyo y los reactivos de extracción de ácidos nucleicos para completar automáticamente la extracción del ácido nucleico de la muestra.

Principios de extracción y purificación de ácidos nucleicos.
1. Debe garantizarse la integridad de la estructura primaria del ácido nucleico;
2. Elimina la contaminación de otras moléculas.
Para asegurar el estudio de la estructura y función del ácido nucleico, una estructura primaria completa es el requisito más básico, porque la información genética se almacena en la estructura primaria, y la estructura primaria del ácido nucleico también determina la forma de su alto nivel. estructura y otras macromoléculas biológicas. La forma de combinación. La purificación del ácido nucleico debe cumplir los tres requisitos siguientes:
1. No hay disolventes orgánicos y concentraciones excesivamente altas de iones metálicos que puedan inhibir las enzimas en las muestras de ácido nucleico;
2. Debe minimizarse la contaminación de otras macromoléculas biológicas como proteínas, polisacáridos y moléculas lipídicas;
3. Eliminar la contaminación de otras moléculas de ácido nucleico, como el ARN que se debe eliminar al extraer moléculas de ADN, y viceversa.


Para garantizar la integridad y pureza del ácido nucleico aislado, se deben tener en cuenta los siguientes elementos durante el experimento:
1. Intente simplificar los pasos operativos y acortar el proceso de extracción para reducir el daño de varios factores nocivos al ácido nucleico;
2. Reducir la degradación de ácidos nucleicos por factores químicos Para evitar daños al enlace fosfodiéster en la cadena de ácido nucleico por sobreácido y sobre base, la operación se lleva a cabo principalmente bajo la condición de pH 4-10;
3. Reducir la degradación de los ácidos nucleicos por factores físicos El principal factor de degradación física es la fuerza de cizallamiento mecánica, seguida de la alta temperatura.
La fuerza de corte mecánica incluye agitación y agitación de la solución fuerte y de alta velocidad para hacer que la solución pase rápidamente a través de los poros estrechos y largos, las células se colocan repentinamente en la solución hipotónica, las células explotan explosivamente y las muestras de ADN se congelan y almacenan repetidamente Se debe prestar atención a estos detalles operativos en la operación experimental El principal peligro del cizallamiento mecánico son las moléculas de ADN lineales con grandes pesos moleculares, como el ADN cromosómico de las células eucariotas.
La amenaza para las moléculas de ADN circulares con pesos moleculares pequeños, como las moléculas de ADN y ARN de plásmido, es relativamente pequeña. La temperatura alta es como hervir durante mucho tiempo. Además de la fuerza de cizallamiento causada por el agua hirviendo, la temperatura alta también puede dañar algunos enlaces químicos en moléculas de ácido nucleico. En el proceso de extracción de ácido nucleico, generalmente se opera a baja temperatura, pero ahora se encuentra que no hay mucha diferencia en la calidad del ácido nucleico obtenido a temperatura ambiente extracción rápida y baja extracción de temperatura.
4. Para prevenir la biodegradación de los ácidos nucleicos, varias nucleasas dentro o fuera de la célula digieren el enlace fosfodiéster en la cadena de ácidos nucleicos y destruyen directamente la estructura primaria del ácido nucleico. Entre ellas, las enzimas del ADN requieren la activación de iones divalentes metálicos Mg2 y Ca2. El uso de EDTA y citrato para quelar iones divalentes de metales puede inhibir básicamente la actividad de la DNasa. La RNasa no solo se distribuye ampliamente, contamina fácilmente la muestra, sino que también es resistente a altas temperaturas, ácidos, álcalis y no es fácil de inactivar, por lo que es el principal factor de peligro en el proceso de extracción de ARN biodegradable.
Los pasos principales de la extracción de ácidos nucleicos no son más que alterar las células, eliminar proteínas unidas a ácidos nucleicos, polisacáridos, lípidos y otras macromoléculas biológicas, eliminar otras moléculas de ácidos nucleicos no deseados, precipitar ácidos nucleicos, eliminar sales, disolventes orgánicos y otras impurezas, y purificación de ácidos nucleicos Espere. El esquema de extracción de ácidos nucleicos debe determinarse de acuerdo con las características del material biológico específico y las moléculas de ácido nucleico a extraer. Para las moléculas de ácido nucleico enriquecidas en un orgánulo específico, el esquema de extracción del orgánulo de antemano y luego extraer la molécula de ácido nucleico diana puede obtener completitud y moléculas de ácido nucleico con alta pureza y alta calidad.

Utilice el método y las precauciones del sistema de extracción de ácido nucleico del método de perlas magnéticas

El sistema de extracción de ácido nucleico es un instrumento que utiliza reactivos de extracción de ácido nucleico coincidentes para completar automáticamente la extracción de ácido nucleico de la muestra. El método de la perla magnética consiste en lisar la muestra de tejido celular a través de la solución de lisis, las moléculas de ácido nucleico libres de la muestra se adsorben específicamente en la superficie de las partículas magnéticas y las impurezas como las proteínas no se adsorben sino que permanecen en la solución. Las perlas magnéticas que transportan ácido nucleico son adsorbidas por una varilla magnética y se mueven a diferentes tanques de reactivos. El ácido nucleico puro se obtiene finalmente mediante agitación rápida repetida y mezclado del líquido, lisis celular, adsorción de ácido nucleico, lavado y elución y otras etapas.

Uso de sistema de extracción de ácido nucleico de perlas magnéticas

Por lo general, hay dos formas de utilizar el sistema de extracción de ácido nucleico del método de perlas magnéticas, a saber, el método de varilla magnética y el método de succión. A continuación explicaremos en detalle las operaciones específicas del método de varilla magnética y el método de succión.

1. Método de varilla magnética

El método de varilla magnética utiliza la transferencia de perlas magnéticas y la inmovilización de líquidos para realizar la separación de ácidos nucleicos. El principio y el proceso son los mismos que los del método de succión. Existe una diferencia en la separación entre perlas magnéticas y líquido. El método de la varilla magnética consiste en separar las perlas magnéticas del líquido residual mediante la adsorción de las perlas magnéticas en la varilla magnética y ponerlas en el líquido en el siguiente paso para realizar la extracción de ácido nucleico.

2. Método de succión

El método de succión también se llama método de pipeteo, que utiliza la transferencia de líquido o la inmovilización de perlas magnéticas para realizar la extracción de ácido nucleico. La transferencia generalmente se realiza mediante la operación del manipulador de control del sistema, y el proceso de extracción es el siguiente:

1) agrietamiento

Agregue el lisado a la muestra, use movimiento mecánico y calentamiento para mezclar la solución de reacción y completar la reacción. Lisar la célula para liberar el ácido nucleico.

2) adsorción

Agregue las perlas magnéticas a la solución de lisis de muestra, mezcle bien y use las perlas magnéticas para tener una fuerte afinidad por los ácidos nucleicos en valores de alto pH y sal. Las perlas magnéticas pueden adsorber ácidos nucleicos. Bajo la acción de un campo magnético externo, separe las perlas magnéticas de la solución. Transfiera la punta al tanque de desechos y deseche la punta.

3) Lavado

Retire el campo magnético externo, use una nueva punta para agregar el tampón de lavado, mezcle bien, elimine las impurezas y elimine el líquido bajo la acción del campo magnético externo.

4) Elución

Retire el campo magnético externo, agregue el tampón de elución con una punta nueva, mezcle bien y el ácido nucleico unido se separe de las perlas magnéticas, de modo que se obtenga el ácido nucleico purificado.

HERO-96

Precauciones

1. El sistema de extracción de ácido nucleico está al menos a 10 cm de otras superficies verticales.

2. El cable de alimentación de entrada del instrumento debe estar conectado a tierra para evitar accidentes por descargas eléctricas.

3. El operador no puede desmontar el instrumento sin autorización y debe tener personal de mantenimiento profesional calificado para completar el reemplazo de componentes o realizar ajustes internos y otras operaciones. Cuando se enciende la alimentación, no reemplace los componentes.

4. La humedad relativa es del 10% al 80%, el aire sin obstrucciones es de 35 ℃ o menos, la presión atmosférica normal (la altitud debe ser inferior a 3000 m), la temperatura de 20-35 ℃ y la temperatura de uso típica de 25 ℃ es la entorno de instalación del instrumento.

5. No coloque el instrumento cerca de una fuente de calor como un calentador eléctrico. Evite salpicar agua u otros líquidos en los componentes electrónicos para evitar cortocircuitos.

6. Tanto la entrada de aire como la salida de aire están ubicadas en la parte posterior del instrumento y, al mismo tiempo, evitan que el polvo o las fibras se acumulen en la entrada de aire y mantienen el conducto de aire sin obstrucciones.

En la actualidad, el extractor de ácido nucleico con método de perlas magnéticas se utiliza ampliamente en varios campos, como la detección de microbios ambientales, la detección de seguridad alimentaria, la seguridad de las transfusiones de sangre, la identificación de medicina forense, el centro de control de enfermedades, el diagnóstico de enfermedades clínicas, la investigación biológica y la cría de animales.

¿Qué son las perlas biomagnéticas y cómo comprarlas?

Las llamadas perlas biomagnéticas se refieren a microesferas superparamagnéticas con un tamaño de partícula fino. Las perlas magnéticas generalmente tienen un paramagnetismo súper fuerte y pueden reunirse rápidamente en un campo magnético, y después de dejar el campo magnético, pueden ayudar a dispersar uniformemente la separación magnética. En segundo lugar, tiene un tamaño de partícula adecuado con una pequeña diferencia para garantizar una respuesta magnética lo suficientemente fuerte sin sedimentación. En tercer lugar, posee abundantes grupos tensioactivos para poder acoplarse con sustancias bioquímicas y separarse de la muestra a ensayar bajo la acción de un campo magnético externo.

En comparación con los métodos de separación tradicionales, el uso de perlas magnéticas para la separación de componentes complejos de muestras bioquímicas puede lograr la separación y el enriquecimiento al mismo tiempo, lo que mejora efectivamente la velocidad de separación y la eficiencia del enriquecimiento, y también hace que la sensibilidad de análisis y detección sea más sensible. . Grandes mejoras.

Características de las perlas magnéticas biológicas en la extracción de ácidos nucleicos

(1) Las perlas magnéticas biológicas pueden realizar la automatización y la operación masiva, cumplir con los requisitos de operación de alto rendimiento de la biología y facilitar una respuesta rápida y oportuna a los principales brotes de enfermedades.

(2) Operación simple y poco tiempo. Todo el proceso de extracción tiene solo cuatro pasos, la mayoría de los cuales se pueden completar en 36-60 minutos;

(3) Es seguro y no tóxico, no usa reactivos tóxicos y se ajusta a los conceptos modernos de protección ambiental; proporciona un entorno saludable para los cuerpos de nuestros investigadores científicos y mejora nuestra confianza en la investigación;

(4) La combinación específica de perlas magnéticas y ácido nucleico aumenta la pureza y concentración del ácido nucleico extraído. Proporcionó una garantía para los experimentos de seguimiento de nuestros investigadores.

Amino Magnetic Beads

Campo de aplicación de perlas biomagnéticas

(1) La extracción de ácido nucleico, la extracción de ADN con perlas magnéticas es una combinación perfecta de nanotecnología y biotecnología, y tiene ventajas que los métodos tradicionales de extracción de ADN no pueden igualar. La extracción de ácidos nucleicos es la base del campo biomédico. Con su alta eficiencia y estabilidad, la extracción de ADN con perlas magnéticas es de gran importancia para el rápido desarrollo de las pruebas genéticas y la medicina personalizada.

(2) La separación celular (CD4, CD8) se puede utilizar además para la detección y el diagnóstico de tumores.

(3) Separación de proteínas y anticuerpos (perlas aminomagnéticas, perlas magnéticas carboxilo, perlas magnéticas epoxi), que se pueden utilizar más para la detección y el diagnóstico de enfermedades.

(4) Detección de metales pesados ​​(perlas magnéticas de sulfhidrilo), que se pueden utilizar para el tratamiento de aguas residuales, etc.

(5) La resonancia magnética nuclear (perlas magnéticas sin recubrimiento) se utiliza para los agentes de contraste.

Al mismo tiempo, las perlas magnéticas biológicas (o microesferas biológicas), como un nuevo portador eficaz para la extracción de ácidos nucleicos, han sido reconocidas por la mayoría de los investigadores científicos. La industria se conoce como «método de perlas magnéticas». La eficiencia del trabajo se ha convertido gradualmente en la solución principal.

Sin embargo, la calidad de las perlas magnéticas varía de buena a mala, y el efecto de extracción no es satisfactorio, lo que es realmente problemático e incluso pone en duda la viabilidad de este nuevo esquema de extracción. Entonces, ¿cómo deberíamos elegir una cuenta biomagnética?

1. Velocidad de asentamiento

La velocidad de asentamiento es a menudo un indicador importante. Cuanto más lenta sea la velocidad de sedimentación, mejor será la uniformidad de la adición de la muestra y mejor será la experiencia operativa. Sin embargo, teniendo en cuenta el rendimiento integral de las perlas magnéticas, la velocidad de sedimentación generalmente se controla a 10-20 minutos, y algunas perlas magnéticas rápidas.La velocidad de sedimentación es de solo 3-5 minutos, lo que requiere atención a la frecuencia de mezcla de las perlas magnéticas en el funcionamiento real, para evitar la adición desigual de muestras y resultados inestables.

Carboxyl Magnetic Beads

2. Tiempo magnético

El corto tiempo de atracción magnética indica que las perlas magnéticas responden mejor y son más fáciles de operar. Sin embargo, cuanto más corto sea el tiempo de atracción magnética, más rápida será la velocidad de asentamiento. En términos generales, el tiempo de atracción magnética está dentro del rango aceptable dentro de los 30 segundos. Sin embargo, algunas marcas de perlas magnéticas, incluidas las perlas magnéticas importadas, tienen un tiempo de atracción magnética de más de 1 minuto. Esto aumentará significativamente el tiempo de espera durante la operación y reducirá la eficiencia de la operación.

3. Capacidad de adsorción de ácidos nucleicos

Muchos clientes creen que la capacidad de adsorción de ácido nucleico de las perlas magnéticas está relacionada con el tamaño de las partículas magnéticas. Las perlas magnéticas con un tamaño de partícula pequeño tienen una gran superficie específica, por lo que la capacidad de adsorción es fuerte. Esta conclusión es teóricamente válida, pero en el funcionamiento real, cuando las perlas magnéticas se utilizan para la adsorción de ácidos nucleicos, se necesitan de 5 a 6 tipos de reactivos. Por lo tanto, queremos que las perlas magnéticas absorban más ácidos nucleicos. Todo el sistema de reactivos y las perlas magnéticas La compatibilidad de los reactivos es un factor importante que afecta los resultados de la extracción. Las perlas magnéticas con un tamaño de partícula pequeño no son adecuadas para ningún sistema de reactivos sin optimización. Por lo tanto, en lugar de gastar energía para encontrar perlas magnéticas con un tamaño de partícula más pequeño, es mejor optimizar todo el sistema de reactivos. La eficiencia puede ser mayor.

Tanto si se trata de un usuario de investigación científica como de un usuario industrial, elegir un fabricante de perlas magnéticas estándar es la clave para asegurar el progreso estable del proyecto. Las perlas biomagnéticas son un producto cruzado de la química sintética y la biología molecular, y sus aplicaciones se concentran en el campo de la biología molecular. Desde esta perspectiva, las empresas biológicas resolverán aplicaciones más prácticas.

Por lo tanto, para los usuarios, el acoplamiento de productos de perlas magnéticas con empresas biológicas será más eficiente en términos de servicio postventa. Se recomienda que busque perlas magnéticas estándar y biológicas durante el proceso de compra de perlas magnéticas. Cociente.

¿Cuáles son los métodos de extracción de ácidos nucleicos?

El ácido nucleico es el portador de información genética, la molécula de información biológica más importante y el principal objeto de la investigación en biología molecular. Por tanto, la extracción de ácidos nucleicos es la operación más importante y básica en la tecnología experimental de biología molecular.

El ácido nucleico se divide en ácido desoxirribonucleico (ADN) y ácido ribonucleico (ARN). El ARN se puede dividir en ARN ribosómico (ARNr), ARN mensajero (ARNm) y ARN de transferencia (ARNt) según sus funciones.

El ADN se concentra principalmente en el núcleo, las mitocondrias y los cloroplastos, mientras que el ARN se distribuye principalmente en el citoplasma.

En los ácidos nucleicos, las bases de purina y las bases de pirimidina tienen dobles enlaces conjugados, por lo que los ácidos nucleicos tienen características de absorción ultravioleta. La absorción ultravioleta de la sal sódica del ADN es de alrededor de 260 nm y su absorbancia está representada por A260. Está en el canal de absorción a 230 nm, por lo que se puede utilizar la espectroscopia ultravioleta. El fotómetro realiza la determinación cuantitativa y cualitativa de ácidos nucleicos.

El ácido nucleico es un electrolito anfótero, que es equivalente a un poliácido. Se puede usar un tampón neutro o alcalino para disociar el ácido nucleico en aniones, que se colocan en un campo eléctrico y se mueven hacia el ánodo. Este es el principio de la electroforesis.

Principios y requisitos de la extracción y purificación de ácidos nucleicos.

1. Asegurar la integridad de la estructura primaria del ácido nucleico;

2. Eliminar la contaminación de otras moléculas (como eliminar la interferencia de ARN al extraer ADN);

3. No debe haber disolventes orgánicos y altas concentraciones de iones metálicos que puedan inhibir las enzimas en las muestras de ácido nucleico;

4. Minimizar al máximo las sustancias macromoleculares como proteínas, polisacáridos y lípidos.

Tipo de extracción de ácido nucleico

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1. Extracción de ARN total

Del ARN total, el 75-85% es ARNr (principalmente ARNr 28S-26S / 23S y 18S / 16S), y el resto está formado por ARNm y ARN pequeño con diferentes pesos moleculares y secuencias de nucleótidos como ARNt, ARNr 5S, 5.8S ARNr, miARN, ARNip, ARN nuclear pequeño (ARN nuclear pequeño, ARNnn) y ARN nucleolar pequeño (ARN nuceolar pequeño, ARNsno) y otros componentes.

2. extracción de miARN

Los microARN (miARN) son moléculas de ARN pequeñas y altamente conservadas, como los ARN de interferencia pequeños (ARNip), que regulan la expresión de sus moléculas de ARNm homólogas mediante el emparejamiento de bases con ellas para evitar la expresión a través de varios mecanismos. Se han convertido en una agencia reguladora clave para el desarrollo, la proliferación celular, la diferenciación y el ciclo celular.

3. Extracción de ADN genómico

Para la investigación de la estructura y función de los genes y el diagnóstico de genes, generalmente se requiere que la longitud del fragmento obtenido no sea inferior a 100-200 kb. En el proceso de extracción de ADN, se deben evitar en la medida de lo posible varios factores que causan la fragmentación y degradación del ADN para garantizar la integridad del ADN y sentar las bases para experimentos posteriores.

4. Extracción de plásmidos

El método de extracción de plásmidos consiste en eliminar el ARN, separar el plásmido del ADN genómico bacteriano y eliminar las proteínas y otras impurezas para obtener un plásmido relativamente puro.

Método de extracción y purificación de ácidos nucleicos.

Pre-packed nucleic acid extraction kit

1. Método de extracción de fenol / cloroformo

Inventado en 1956, después del tratamiento con fenol / cloroformo de un líquido triturador de células o un homogeneizado de tejidos, los componentes del ácido nucleico compuestos principalmente por ADN se disuelven en la fase acuosa, y los lípidos están contenidos principalmente en la fase orgánica y las proteínas se encuentran entre las dos fases.

2. Método de precipitación de alcohol

El etanol puede eliminar la capa de hidratación de ácido nucleico y exponer los grupos fosfato cargados negativamente. Los iones cargados positivamente como NA ﹢ pueden combinarse con los grupos fosfato para formar un precipitado.

3. Método de columna de cromatografía

A través del material especial de adsorción de matriz de silicio, el ADN se puede adsorber específicamente, y el ARN y la proteína pueden pasar sin problemas, y luego usar alto contenido de sal y bajo pH para unir el ácido nucleico, y elución de bajo contenido de sal y alto pH para separar y purificar el ácido nucleico.

4. Método alcalino de craqueo térmico

La extracción alcalina utiliza principalmente la diferencia topológica entre plásmidos circulares covalentemente cerrados y cromatina lineal para separarlos. En condiciones alcalinas, las proteínas desnaturalizadas son solubles.

5. Método de agrietamiento por ebullición

Calentar la solución de ADN para utilizar las características de las moléculas de ADN lineales para separar los fragmentos de ADN del precipitado formado por proteínas desnaturalizadas y restos celulares por centrifugación.

6. Método de cuentas nano magnéticas

La superficie de las nanopartículas superparamagnéticas es modificada y modificada por nanotecnología para preparar perlas nanomagnéticas de óxido de silicio superparamagnéticas. Las perlas magnéticas pueden reconocer específicamente y combinarse eficientemente con moléculas de ácido nucleico en la interfaz microscópica. Utilizando el superparamagnetismo de nanoesferas de sílice, bajo la acción de sales caotrópicas (clorhidrato de guanidina, isotiocianato de guanidina, etc.) y un campo magnético externo, se separan ADN y ARN de sangre, tejidos animales, alimentos, microorganismos patógenos y otras muestras.

7. Otros métodos

Además de los métodos comúnmente usados ​​mencionados anteriormente, existen múltiples métodos tales como ultrasonidos, congelación y descongelación repetidas, hidrólisis enzimática y lisis hipotónica.

Para detener el nuevo coronavirus (2019-nCoV), Ascend está en acción

A las 0:00 del 23 de enero se han confirmado en mi país un total de 571 casos de neumonía por el nuevo coronavirus y han fallecido 17 casos.

Cambios en la epidemia de neumonía causada por la nueva infección por coronavirus en Wuhan

Fecha

Casos confirmados acumulativos

Curado acumulado y descargado

Tratamiento de enfermedades graves

Muertes acumuladas

1.14

41

7

6

1

1.15

41

12

5

2

1.16

45

15

5

2

1.17

62

19

8

2

1.18

121

24

——

3

1.19
198

25

44

3

Como fabricante profesional de reactivos de extracción de ácido nucleico, Ascend Biotech ajustó la configuración de producción por primera vez y preparó reactivos de extracción de ácido nucleico (método de perlas magnéticas) y reactivos de detección de virus que se pueden automatizar.

Ventajas del producto:

1. Detección automatizada. Con el sistema de extracción de ácido nucleico HERO 32 desarrollado independientemente por Aisen Biotechnology, solo necesita agregar la muestra a la placa de pozos profundos y ejecutar el programa correspondiente. Se pueden extraer varias muestras en 15-60 minutos, lo que es eficiente y rápido y puede proteger a los operadores experimentales. Seguridad.

2. Gran tamaño de muestra para una sola prueba. El kit tiene dos tamaños de 64T y 50T, que pueden extraer múltiples muestras en una extracción, reduciendo el tiempo de espera y aumentando la eficiencia.

3. Especificidad y precisión. El principio especial de extracción de perlas magnéticas hace que el kit tenga una alta especificidad y precisión para la extracción de ARN.

Luoyang Ascend Biotechnology Co., Ltd. es un fabricante profesional de reactivos de extracción de ácido nucleico que se centra en el campo del procesamiento de muestras de las ciencias de la vida. Aisen toma perlas nanobiomagnéticas como núcleo para producir un instrumento de extracción de ácido nucleico y su kit de extracción de ácido nucleico con método de perlas magnéticas. Solo necesitas brindar soluciones de diseño acordes a tus necesidades.

Ascend le proporcionará una sólida capacidad de producción y un estricto control de calidad. Servicio, sea su fuerte respaldo en el mercado. En 2019, en la prevención y el control de la epidemia, Essen ha proporcionado casi un millón de reactivos, lo que ha contenido de manera efectiva la propagación de la epidemia y bloqueó el nuevo coronavirus (2019-nCoV). ¡Essen sigue luchando!

La investigación muestra: las anomalías genéticas están relacionadas con la parálisis cerebral

Un nuevo estudio publicado en la revista Nature encontró que existe una asociación entre la parálisis cerebral y la variación genética. Este sorprendente descubrimiento desafía la afirmación de que los factores ambientales son la única causa de la parálisis cerebral.

Según el coautor del estudio, Stephen Scherer, muchas personas no se mostraron optimistas acerca de este estudio al principio, porque durante muchos años se creyó que los genes no tenían ningún efecto sobre la parálisis cerebral.

Después de examinar los genes de 115 niños con parálisis cerebral y sus padres, los investigadores encontraron que el 10% de estos niños tenían anomalías cromosómicas. Scherer dijo que el 10% es una proporción muy significativa y este descubrimiento es muy impactante.

Según los investigadores, la ubicación del problema con el gen del niño con la mutación está en la región de variación del número de copias.

Se entiende que la variación del número de copias se refiere al aumento o disminución del número de copias de grandes fragmentos del genoma con una longitud de más de 1 kb. La variación provocará solo una o tres copias del gen copiado de ambos padres. Uno de los genes puede eliminarse o copiarse adicionalmente.

Scherer dijo que todo el mundo tiene variaciones en el número de copias, pero los niños del estudio tienen mucha variación en el número de copias, lo que afecta a decenas a cientos de genes. Antes de esto, los científicos siempre han creído que la parálisis cerebral, una enfermedad común que causa discapacidades físicas en los niños, es causada por infecciones o accidentes cerebrovasculares que ocurren en los bebés durante el embarazo o al nacer. Las personas considerarán los factores genéticos solo cuando no haya un impacto ambiental obvio. .

En la actualidad, los investigadores creen que las pruebas genéticas también deberían convertirse en un método de prueba estándar para ayudar a los padres a detectar anomalías en sus hijos y detectar otras enfermedades a tiempo.

Disputa de valoración de BGI: 19 valor de mercado límite diario de 38 mil millones de yuanes, con 1.6 mil millones de activos

Un reportero de Beijing News señaló que BGI ha recaudado fondos varias veces en los últimos dos años, con más de 40 accionistas institucionales detrás.

El prospecto muestra que antes de salir a bolsa, BGI ha experimentado principalmente tres rondas de financiamiento: en 2012 para BGI Technology, BGI Medical en 2014 y 2015 después de la reorganización médica y tecnológica de las acciones de BGI.

En 2012, Huada Holdings anunció la adquisición de Complete Genomics, una empresa estadounidense de secuenciación de genes. Para recaudar fondos, Huada vendió el 42% de su subsidiaria Huada Technology y recaudó 1398 millones de yuanes. Fue liderado por Sequoia Capital y China Everbright, Shenzhen Venture Capital, Yunfeng Investment, Jinglin Assets, Taishan Investment, Softbank China, Shengqiao Investment y otras instituciones conocidas están preseleccionadas para financiamiento.

En mayo de 2014, BGI comenzó a introducir inversores institucionales externos. Según la valoración general de 10 mil millones, 8 inversores institucionales externos aumentaron el capital social de BGI en un total de 295 millones de yuanes, lo que representó 2,0824 millones de yuanes de capital social después del aumento de capital. 3,35%.

En el primer semestre de 2015, Huada Medical introdujo una vez más instituciones de inversión externas como Heyu Gaolin y China Life Insurance, y basándose en la valoración general de aproximadamente 19.100 millones de yuanes en el valor patrimonial total de Huada Medical y Huada Technology antes de la inversión como el aumento de capital y la base de precios de transferencia. Entre ellos, Shenzhen Heyu Gaolin adquirió 35.849.600 acciones de Huada Medical con una inversión de capital de 2.000 millones de yuanes, convirtiéndose en el tercer mayor accionista después de Huada Holdings y Huada Investment.

Las estadísticas muestran que después de tres rondas de financiamiento, BGI, con BGI Medical y BGI Technology como el organismo principal, presentó a más de 40 inversores institucionales, con una inversión total de 7.215 millones de yuanes, mientras que BGI ha cobrado 4.296 millones. yuan.

La valoración previa a la OPI de Huada Gene fue de 19.000 millones de yuanes. Después de experimentar un límite inferior el 11 de agosto, el valor de mercado de Huada Gene fue de alrededor de 38 mil millones de yuanes. En la última ronda de acciones de Huada Gene, el valor contable fue solo del doble. Tomando a Rongzhilian como ejemplo, una vez reveló que el costo de invertir en Huada Gene era de 35 millones de yuanes. Hoy, el valor de mercado de las acciones de BGI en poder de Rongzhilian es de 89,714 millones de yuanes. Sin embargo, el prospecto muestra que los accionistas de Huada Genetics Institution podrán levantar la prohibición después de un año.

En cuanto al valor de mercado de Huada Gene, la valoración que dan las casas de bolsa no es alta. El reportero de Beijing News señaló que desde la OPI de Huada Gene, más de 14 agencias de corretaje han publicado informes de investigación al respecto. El precio más alto de las acciones de la institución de corretaje de Huada Gene es de 94,4 yuanes por acción, y el más bajo es de 46,35 yuanes por acción.

En el último informe de investigación, Caitong Securities analizó que el valor de mercado razonable de Huada Gene era de 25,83 mil millones a 34,44 mil millones de yuanes, lo que corresponde a un rango razonable de 64,57 a 86,09 yuanes en 2017. Southwest Securities le dio a BGI una relación P / E de 60 a 80 veces. en 2017, que corresponde a un rango de valor de mercado razonable de 25,8 mil millones a 34,4 mil millones de yuanes, y un rango de precio de las acciones de 70,8 a 94,4 yuanes.

El retorno de Zero2IPO sobre las OPI con apoyo institucional para cotizar en el primer trimestre de este año muestra que las empresas cotizadas en GEM de Shenzhen tuvieron un retorno de inversión contable promedio de 2,42 veces en la fecha de emisión, y después de 20 días hábiles de cotización, el retorno contable promedio de instituciones fue de 9,44. Veces. BGI ahora se cotiza en el vigésimo día de negociación. Calculado a una tasa de rendimiento de 9,44 veces, el valor de mercado debería ser de 100 mil millones de yuanes, mucho más alto que el valor de mercado actual de BGI.

Los servicios de salud reproductiva representan más de la mitad de los ingresos

Según el prospecto, de 2014 a 2016, los ingresos operativos de BGI fueron de 1.132 millones de yuanes, 1.319 millones de yuanes y 1.711 millones de yuanes, y las ganancias netas fueron de 59 millones de yuanes, 272 millones de yuanes y 350 millones de yuanes, respectivamente. Entre ellos, los servicios de salud reproductiva han sido la principal fuente de ingresos de BGI en los últimos años, lo que representa un aumento del 31,71% en 2014 al 54,62% ​​en 2016.

En 2016, los servicios de salud reproductiva generaron ingresos de BGI Gene de 929 millones de yuanes, con un margen de beneficio bruto del 76,41%. El prospecto de BGI muestra que los elementos de servicio proporcionados por los servicios de salud reproductiva incluyen principalmente detección de anomalías cromosómicas fetales no invasivas, detección de genes de sordera neonatal, detección de enfermedades metabólicas genéticas neonatales y detección de enfermedades de un solo gen. Entre ellos, el cribado prenatal no invasivo (NIPT) para prevenir defectos neonatales es el campo más maduro de aplicación clínica de la secuenciación de genes.

BGI no reveló su participación de mercado de NIPT en el prospecto, pero los anuncios de puerta trasera de sus pares, Berry y Kang, pueden comparar la situación de BGI. Berry and Kang, fundada en 2010, también se originó en BGI. El plan de reorganización de Berry y Kang Backdoor * ST Tianyi muestra que su fundador y presidente Gao Yang se desempeñó anteriormente como gerente general de la División de Salud Genética de BGI.

Berry y Kang revelaron en el plan de reestructuración de puerta trasera que en 2016, logró ingresos de 922 millones de yuanes. El negocio de Berry Hekang consiste en casi todas las pruebas genéticas prenatales no invasivas y la venta de kits de instrumentos, similar a los servicios de pruebas genéticas de salud reproductiva de BGI. En 2016, los servicios de salud reproductiva generaron ingresos de BGI de 929 millones de yuanes. .

Berry Hekang reveló en el plan de reestructuración de puerta trasera que en 2016, la participación de mercado de Berry Hekang en el sector de servicios nacionales NIPT fue de aproximadamente 33,06% -37,19%. Los ingresos de BGI en el campo del servicio NIPT son similares a los de Berry y Kang, y su participación de mercado debería ser similar.

El informe de la industria NIPT muestra que el mercado NIPT de mi país estaba básicamente monopolizado por BGI y Berry y Kang en la etapa inicial. En 2013, BGI y Berry y Kang representaron el 46%, y Berry y Kang representaron el 40%. En cuanto a la última participación de mercado de BGI, Berry y Kang, BGI ha disminuido significativamente. El informe dice que en el campo de los servicios de pruebas genéticas para la salud reproductiva, donde el mercado se está estabilizando gradualmente, la competencia entre las empresas se volverá más intensa.

Tiene 1.600 millones de yuanes en productos de gestión patrimonial antes de cotizar

En comparación con otras empresas que optan por cotizar en bolsa para obtener financiación para obtener fondos de desarrollo empresarial, BGI puede describirse como «dinero no malo». El prospecto muestra que el índice de endeudamiento de BGI en 2014 fue solo del 28,47%, y el índice de endeudamiento ha seguido disminuyendo en los dos años siguientes. A fines de 2016, la deuda total de BGI fue de 778 millones de yuanes, y los activos totales del mismo período fueron de 4.230 millones de yuanes, y el índice de deuda fue solo del 18,38%. .

En el desglose de los pasivos de BGI, sus principales pasivos son los pasivos operativos, entre los cuales el monto de las cuentas anticipadas recibidas a lo largo de los años es relativamente grande y la proporción de pasivos supera el 50%. En 2016, BGI Gene recibió 438 millones de yuanes por adelantado, lo que representa el 56,3% del pasivo total.

Los pasivos financieros representan muy poco en el balance de BGI. De 2014 a 2016, los préstamos a corto plazo de BGI Gene a lo largo de los años fueron millones. A finales de 2016, el préstamo a corto plazo de BGI era de solo 3 millones de yuanes y no había ningún préstamo a largo plazo.

Con pocos pasivos financieros, los activos de BGI han crecido rápidamente en los últimos dos años. En 2014, los activos totales de BGI Gene fueron de 2.050 millones de yuanes. A finales de 2016, los datos de activos totales aumentaron a 4.230 millones de yuanes, y los activos totales se duplicaron en dos años.

El aumento de los activos de BGI se refleja principalmente en otros activos corrientes. En 2014, los otros activos circulantes de BGI eran solo 12,5142 millones de yuanes, que aumentaron a 1,883 millones de yuanes en 2015. Aunque disminuyó en 2016, todavía era tan alto como 1,726 millones de yuanes. Yuan, que representa el 53,89% de los activos corrientes de BGI.

El prospecto de BGI muestra que en sus miles de millones de otros activos corrientes, los productos de gestión de patrimonio bancario representan casi todos. Por ejemplo, entre otros activos corrientes de 1,883 millones de yuanes en 2015, el saldo de los productos de gestión patrimonial y los intereses fue de 1,860 millones de yuanes, lo que representa el 98,79%.

A finales de 2016, los productos relacionados con la gestión patrimonial y los intereses vendidos por grandes bancos comerciales como el Banco de China, el Banco Industrial y Comercial de China y el Banco Agrícola de BGI totalizaron 1,609 millones de yuanes. Ese año, los ingresos por intereses de BGI aumentaron a 73.465.800 yuanes.

Los fondos utilizados por BGI para adquirir la gestión patrimonial pueden derivarse de sus ingresos financieros en los últimos años. El prospecto muestra que en 2015, la actividad neta de efectivo generada por las actividades financieras de BGI fue de 1,651 millones de yuanes. A finales de 2015, el saldo de los fondos monetarios de BGI aumentó en menos de 8 millones de yuanes en comparación con 2014. En el mismo período, la salida neta de inversión extranjera de BGI fue de 1.978 millones de yuanes.

El índice de endeudamiento es bajo y la mayor parte de los más de mil millones de yuanes en financiamiento externo se utiliza para comprar financiamiento bancario, lo que demuestra que BGI «no está mal para el dinero». El prospecto muestra que la OPI de BGI recaudó una cantidad de 547 millones de yuanes y la cantidad neta de fondos recaudados fue de 483 millones de yuanes, lo que solo equivale al 30% de los fondos de gestión financiera de BGI a fines de 2016.

La mayoría de los fondos recaudados por la OPI todavía son utilizados por BGI para comprar productos de gestión patrimonial. El 11 de agosto, BGI anunció que decidió utilizar fondos recaudados temporalmente inactivos con una cuota de no más de 300 millones de yuanes para la gestión de efectivo y la compra de productos de gestión de patrimonio de alta seguridad garantizados por el banco.

El precio actual de las acciones excede el precio objetivo dado por el corredor

Un reportero de Beijing News señaló que BGI ha recaudado fondos varias veces en los últimos dos años, con más de 40 accionistas institucionales detrás.

El prospecto muestra que antes de salir a bolsa, BGI ha experimentado principalmente tres rondas de financiamiento: en 2012 para BGI Technology, BGI Medical en 2014 y 2015 después de la reorganización médica y tecnológica de las acciones de BGI.

En 2012, Huada Holdings anunció la adquisición de Complete Genomics, una empresa estadounidense de secuenciación de genes. Para recaudar fondos, Huada vendió el 42% de su subsidiaria Huada Technology y recaudó 1398 millones de yuanes. Fue liderado por Sequoia Capital y China Everbright, Shenzhen Venture Capital, Yunfeng Investment, Jinglin Assets, Taishan Investment, Softbank China, Shengqiao Investment y otras instituciones conocidas están preseleccionadas para financiamiento.

En mayo de 2014, BGI comenzó a introducir inversores institucionales externos. Según la valoración general de 10 mil millones, 8 inversores institucionales externos aumentaron el capital social de BGI en un total de 295 millones de yuanes, lo que representó 2,0824 millones de yuanes de capital social después del aumento de capital. 3,35%.

En el primer semestre de 2015, Huada Medical introdujo una vez más instituciones de inversión externas como Heyu Gaolin y China Life Insurance, y basándose en la valoración general de aproximadamente 19.100 millones de yuanes en el valor patrimonial total de Huada Medical y Huada Technology antes de la inversión como el aumento de capital y la base de precios de transferencia. Entre ellos, Shenzhen Heyu Gaolin adquirió 35.849.600 acciones de Huada Medical con una inversión de capital de 2.000 millones de yuanes, convirtiéndose en el tercer mayor accionista después de Huada Holdings y Huada Investment.

Las estadísticas muestran que después de tres rondas de financiamiento, BGI, con BGI Medical y BGI Technology como el organismo principal, presentó a más de 40 inversores institucionales, con una inversión total de 7.215 millones de yuanes, mientras que BGI ha cobrado 4.296 millones. yuan.

La valoración previa a la OPI de Huada Gene fue de 19.000 millones de yuanes. Después de experimentar un límite inferior el 11 de agosto, el valor de mercado de Huada Gene fue de alrededor de 38 mil millones de yuanes. En la última ronda de acciones de Huada Gene, el valor contable fue solo del doble. Tomando a Rongzhilian como ejemplo, una vez reveló que el costo de invertir en Huada Gene era de 35 millones de yuanes. Hoy, el valor de mercado de las acciones de BGI en poder de Rongzhilian es de 89,714 millones de yuanes. Sin embargo, el prospecto muestra que los accionistas de Huada Genetics Institution podrán levantar la prohibición después de un año.

En cuanto al valor de mercado de Huada Gene, la valoración que dan las casas de bolsa no es alta. El reportero de Beijing News señaló que desde la OPI de Huada Gene, más de 14 agencias de corretaje han publicado informes de investigación al respecto. El precio más alto de las acciones de la institución de corretaje de Huada Gene es de 94,4 yuanes por acción, y el más bajo es de 46,35 yuanes por acción.

En el último informe de investigación, Caitong Securities analizó que el valor de mercado razonable de Huada Gene era de 25,83 mil millones a 34,44 mil millones de yuanes, lo que corresponde a un rango razonable de 64,57 a 86,09 yuanes en 2017. Southwest Securities le dio a BGI una relación P / E de 60 a 80 veces. en 2017, que corresponde a un rango de valor de mercado razonable de 25,8 mil millones a 34,4 mil millones de yuanes, y un rango de precio de las acciones de 70,8 a 94,4 yuanes.

El retorno de Zero2IPO sobre las OPI con apoyo institucional para cotizar en el primer trimestre de este año muestra que las empresas cotizadas en GEM de Shenzhen tuvieron un retorno de inversión contable promedio de 2,42 veces en la fecha de emisión, y después de 20 días hábiles de cotización, el retorno contable promedio de instituciones fue de 9,44. Veces. BGI ahora se cotiza en el vigésimo día de negociación. Calculado a una tasa de rendimiento de 9,44 veces, el valor de mercado debería ser de 100 mil millones de yuanes, mucho más alto que el valor de mercado actual de BGI.