核酸提取的原理首先保证了核酸一级结构的完整性，其次消除了其他分子的污染。提取时，应注意缩短提取时间，减少化学和物理因素，机械剪切力和高温引起的核酸降解，并防止核酸的生物降解。核酸提取的方法有哪些？

1.浓盐法
（1）利用RNP和DNP在电解液中的不同溶解度来分离两者，常用的方法是提取DNP粘液，方法是用1M氯化钠萃取氯化钠，然后与含有少量辛醇的氯仿一起振摇，从而制得乳化液。并离心去除蛋白质。此时，蛋白质凝胶停留在水相和氯仿相之间，而DNA在上层水相中。 DNA的钠盐可用体积为95％乙醇的2倍沉淀。

（2）您也可以使用0.15 M NaCL反复洗涤细胞破碎溶液以去除RNP，然后用1 M NaCL提取脱氧核糖核酸，然后通过氯仿-异醇法去除蛋白质。比较这两种方法，第二种方法可以减少核酸降解。

（3）用稀盐酸溶液提取DNA时，添加适量的去污剂（如SDS）可以帮助分离蛋白质和DNA。在提取过程中，为了抑制组织中DNase对DNA的降解，将柠檬酸钠添加到氯化钠溶液中作为金属离子的熔化剂，通常是15M NaCL，0.015M柠檬酸钠，称为SSC溶液，提取DNA。

2.阴离子去污剂法
诸如SDS或木酸钠的洗涤剂可用于使蛋白质变性，并且可以直接从生物材料中提取DNA。由于细胞中的DNA和蛋白质通常通过静电吸引或配位键结合在一起，因此阴离子去污剂可以破坏这种情况。价键的一种，因此阴离子去污剂通常用于提取DNA。

3.苯酚提取方法
苯酚充当蛋白质变性剂，同时抑制DNase的降解。当用酚处理匀浆时，蛋白质和DNA之间的键断裂，蛋白质分子的表面含有许多与酚相容的极性基团，蛋白质分子可溶于苯酚。相，而DNA可溶于水相。离心和分层后，取出水层，重复几次操作，然后合并含DNA的水相，并利用核酸的不溶于醇的性质用乙醇沉淀DNA。此时，DNA是一种非常粘稠的物质，可以通过将其包裹在玻璃球中而将其取出。该方法的特点是使提取的DNA保持其自然状态。

4.水的提取方法
利用核酸的性质将其溶解在水中，然后破坏组织细胞，用低盐溶液除去RNA，然后将沉淀物溶解在水中，从而将DNA完全溶解在水中。离心后，收集上清液，并向上清液中添加固体氯化钠。至2.6M，加入2倍体积的95％乙醇，立即搅拌，然后分别用66％，80％和95％乙醇和丙酮洗涤。

上面简要介绍了核酸提取的方法， Ascend为核酸提取产品提供专业和完整的铸造服务。

随着新的冠状病毒的爆发，尽管已得到控制，但每个人仍然不能掉以轻心。每个人都应该知道，所有疑似病例和发烧患者都必须接受核酸检测，以确认它们是否是新的冠状病毒。核酸检测的步骤主要分为三个步骤：
1.采样：从呼吸道或人体其他部位收集可能含有病毒的样品。
2.提取：从样品中提取病毒核酸并将其与其他物质分离。
3.检测：通过荧光定量PCR方法检测提取的病毒含量。
其中，磁珠是核酸提取的必要工具之一。那么用于核酸提取的磁珠的分类和功能是什么？
磁珠的分类和功能：根据表面性质，它们可分为以下三类

1.硅羟基磁珠
这是使用最广泛的磁珠之一。使用硅烷醇磁珠提取核酸时，通常需要高浓度的离液盐（NaI，NaClO4，GuHCI，GuSCN等）。高浓度的盐离子可以有效地屏蔽溶液中的静电排斥。同时，离液盐离子还可以与磁珠和核酸分子的表面竞争结合，破坏两个表面上的原始水合层，并促进磁表面之间的吸附（氢键+范德华力）珠和核酸分子。由于常用的离液盐（例如胍离子）对PCR有抑制作用，因此必须在随后的洗涤步骤中将其除去。去除效果可以通过吸光度比来监控。

2.羧基磁珠
除了能够在高浓度离液盐环境中结合核酸分子外，此类磁珠还可以通过另一种特殊的机制结合核酸分子。通过向溶液中添加一定浓度的PEG和NaCl，核酸分子可以从拉伸的构象逐渐卷曲成小球形，并且其上的大多数负电荷也被屏蔽，从而促进了核酸的吸附酸分子到磁珠。核酸分子的分子量越大，从伸展的线圈到卷曲的球的构象变化就越有可能发生。因此，通过调节盐溶液与核酸样品的体积比，可以在羧基磁珠上获得更大分子量的核酸片段。在表面上的优先吸附实现了所谓的碎片筛选效果。

3.氨基/咪唑基和其他带正电的磁珠
通过调节pH，这样的磁珠可以容易地实现核酸分子在表面上的可逆结合。然而，由于带正电的表面太强地吸附核酸分子，因此容易导致产率低。因此，带正电的磁珠的使用不如硅烷醇和羧基磁珠广泛。
上面详细解释了用于核酸提取的磁珠的分类和功能。 Aisen以纳米生物磁珠为核心，生产核酸提取器及其配套的磁珠核酸提取试剂盒。

核酸提取系统是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。磁珠法是通过裂解液裂解细胞组织样本，从样本中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面，蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附携带核酸的磁珠移动至不同的试剂槽内，通过反复快速搅拌、混匀液体，经过细胞裂解、核酸吸附、洗涤与洗脱等步骤，最终得到纯净的核酸。

磁珠法核酸提取系统使用

磁珠法核酸提取系统使用方法通常有了两种即磁棒法和抽吸法，下面我们就针对磁棒法和抽吸法的具体操作进行以下详解。

1.磁棒法

磁棒法是利用磁珠的转移，液体的固定来使核酸的分离得以实现。其和抽吸法的原理和过程相同。磁珠和液体分离的方式有差异。磁棒法是通过磁棒对磁珠的吸附从废液中分离开磁珠，在下一步的液体中将其放入，使核酸的提取得以实现。

2.抽吸法

抽吸法又称为移液法，是利用液体的转移或者磁珠的固定来使核酸的提取得以实现的。通常利用对系统控制机械臂的操作来实现转移，有如下提取过程：

1) 裂解

将裂解液加入到样品中，利用机械运动及加热来混匀反应液和使反应充分。裂解细胞，使核酸释放出来。

2) 吸附

将磁珠加入到样品裂解液中，充分混匀，通过磁珠在高盐低PH值下对核酸亲和力很强的特点，对核酸吸附，在外加磁场作用下，分离磁珠与溶液，通过吸头转移到废液槽中，弃掉吸头。

3) 洗涤

将外加磁场撤去，使用新吸头将洗涤缓冲液加入，充分混匀，将杂质去除，在外加磁场作用下，移出液体。

4) 洗脱

将外加磁场撤去，使用新吸头将洗脱缓冲液加入，充分混匀，结合的核酸就和磁珠分离，从而使纯化的核酸获得。

注意事项

1.核酸提取系统至少离其他竖直面10cm。

2.仪器的输入电源线必须接地以防止触电事故。

3.操作人员不可以擅自对仪器进行拆解，必须有持证的专业维修人员完成更换元件或进行机内调节等操作，当接通电源时，不要更换元件。

4.相对湿度10%-80%、畅通流入的空气为35℃或以下，正常的大气压(海拔高度应该低于3000m)、温度20-35℃、典型使用温度25℃为仪器的安装环境。

5.不要在如电暖炉等靠近热源的地方放置仪器应当防止将水或者其他液体溅入电子元件中以避免短路。

6.进风口和排风口均在仪器背面的位置，同时同时防止在进风口聚集灰尘或纤维，风道保持畅通。

目前磁珠法核酸提取仪在环境微生物检测、食品安全检测、输血安全、法医学鉴定、疾病控制中心、临床疾病诊断、生物学研究以及畜牧业等多种领域得到广泛地应用。

核酸是遗传信息的载体，是最重要的生物信息分子，是分子生物学研究的主要.对象，因此，核酸的提取是分子生物学实验技术中最重要、最基本的操作。

核酸分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA），其中RNA又可以根据功能的不同分为核糖体RNA(rRNA)，信使RNA（mRNA）和转移RNA（tRNA）。

DNA主要集中在细胞核内，线粒体和叶绿体中，而RNA主要分布在细胞质当中。

核酸中因为嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键，所以核酸具有紫外吸收的特性，DNA钠盐的紫外吸收在260nm附近，其吸光率以A260表示，在230nm处于吸收低谷，因此可以使用紫外分光光度计对核酸进行定量及定性测定。

核酸为两性电解质，相当于多元酸，可以使用中性或偏碱性的缓冲液使核酸解离成阴离子，置于电场中向阳极运动，这就是电泳的原理。

核酸提取纯化原则和要求

1、保证核酸一级结构的完整性

2、排除其它分子的污染（如提取DNA时排除RNA的干扰）

3、核酸样品中不应存在对酶有抑制作用的有机溶剂和高浓度的金属离子

4、尽可能降低蛋白质、多糖和脂类等大分子物质

核酸提取类型

1、总RNA提取

总RNA中，75-85%为rRNA(主要是28S-26S/23S和18S/16S rRNA)，其余的由分子量大小和核苷酸序列各不相同的mRNA和小分子RNA如tRNA、5S rRNA、5.8S rRNA、miRNA、siRNA、小核RNA（small nuclear RNA，snRNA）及核仁小分子RNA（small nuceolar RNA，snoRNA）等组成。

2、miRNA提取

MicroRNAs (miRNAs)是小型的、高度保守的RNA分子，如小干扰RNAs (siRNAs)，通过与他们的碱基配对调节其同源mRNA的分子表达，以预防通过各种机制的表达。他们已成为进行发育、细胞增殖、分化和细胞周期的重点监管机构。

3、基因组DNA提取

进行基因结构和功能研究以及基因诊断，通常要求得到的片段长度不小于100～200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。

4、质粒抽提

质粒抽提方法即去除RNA，将质粒与细菌基因组 DNA分开，去除蛋白质及其它杂质，以得到相对纯净的质粒。

核酸提取纯化方法

1、酚/氯仿抽提法

1956年发明，通过酚/氯仿处理细胞破碎液或者组织匀浆后，在水相中主要溶解以DNA为主的核酸成分，在有机相中主要是脂类物质，蛋白质位于两相之间。

2、醇沉淀法

乙醇能够消除核酸的水化层，使带负电荷的磷酸基团暴露出来，NA﹢等带正电荷离子能与磷酸基团结合，形成沉淀。

3、层析柱法

通过特殊硅基质吸附材料，能够特定吸附DNA，而RNA和蛋白质顺利通过，然后利用高盐低PH结合核酸，低盐高PH值洗脱，来分离纯化核酸。

4、热裂解碱法

碱法提取主要是利用共价闭合环状质粒与线性染色质在拓扑学上的差异来分离他们，在碱性下，变性蛋白是可溶的。

5、煮沸裂解法

加热处理DNA溶液，利用线性DNA分子的特性，通过离心将DNA片段与变性蛋白质和细胞碎片形成的沉淀分离。

6、纳米磁珠法

运用纳米技术对超顺磁性纳米颗粒的表面进行改良和表面修饰后，制备成超顺磁性氧化硅纳米磁珠。该磁珠能在微观界面上与核酸分子特异性地识别和高效结合。利用氧化硅纳米微球的超顺磁性，在Chaotropic盐(盐酸胍、异硫氰酸胍等)和外加磁场的作用下，从血液、动物组织、食品、病原微生物等样本中分离出DNA和RNA。

7、其他方法

除了上述常用的方法之外，还有超声法、反复冻融法、酶解法及低渗裂解等等多种方法。

发表在《自然》杂志上的一项新研究发现，脑瘫与遗传变异之间存在关联。 这一令人惊讶的发现挑战了环境因素是脑瘫的唯一原因的说法。

根据该研究的合著者史蒂芬·谢勒（Stephen Scherer）的说法，许多人起初对这项研究并不乐观，因为多年来人们一直认为基因对脑瘫没有影响。

在检查了115名脑瘫患儿及其父母的基因后，研究人员发现这些患儿中有10％具有染色体异常。 Scherer说10％是非常重要的比例，这一发现令人震惊。

根据研究人员的说法，有突变的孩子的基因存在问题的位置在拷贝数变异区域。

应当理解，拷贝数变异是指长度大于1kb的大基因组片段的拷贝数的增加或减少。 该变异将仅导致从父母双方复制的基因的一个或三个副本。 基因之一可以被删除或另外复制。

谢勒说，每个人都有拷贝数变异，但是研究中的孩子有很多拷贝数变异，影响数十到数百个基因。 在此之前，科学家一直认为脑瘫是一种导致儿童身体残疾的常见疾病，是由孕妇在怀孕或分娩时发生的感染或中风引起的。 只有在没有明显的环境影响时，人们才会考虑遗传因素。 。

目前，研究人员认为，基因检测也应该成为一种标准的检测方法，以帮助父母发现孩子的异常并及早发现其他疾病。