¿Cuáles son las funciones de las perlas inmunomagnéticas?
En los últimos años, las perlas inmunomagnéticas han atraído cada vez más la atención de los científicos y sus aplicaciones en el campo de la biomedicina se han vuelto cada vez más extensas. Pero, de hecho, las perlas inmunomagnéticas no son productos nuevos que se hayan desarrollado recientemente. Ya a fines de la década de 1980, comenzó a desempeñar un papel importante en el campo de la separación y el enriquecimiento celular.
Las perlas inmunomagnéticas generalmente tienen un paramagnetismo súper fuerte. En presencia de un campo eléctrico externo, las perlas inmunomagnéticas exhibirán magnetismo y se agregarán. Después de salir del campo magnético, pueden dispersarse uniformemente como partículas ordinarias. La superficie de las perlas inmunomagnéticas generalmente tiene abundantes grupos tensioactivos, y las moléculas biológicamente activas se pueden adsorber o acoplar a su superficie, para realizar su uso en la clasificación celular, separación y extracción de ácidos nucleicos, inmunoensayo, purificación biológica de macromoléculas e inmovilización enzimática. etc. Aplicaciones en múltiples campos.
La extracción de ácidos nucleicos es una de las primeras aplicaciones de las perlas magnéticas y el método no ha cambiado mucho en décadas. Al ajustar el valor de pH del tampón, el ácido nucleico se une a las perlas magnéticas mediante adsorción electrostática. Luego, bajo la condición de un campo eléctrico externo, el líquido residual se retira y se lava, y finalmente se puede obtener una muestra de ácido nucleico puro.
El método de perlas magnéticas evita pasos como aspirar y centrifugar a alta velocidad, y puede reducir el daño a la muestra causado por fuerzas externas. El método de extracción de perlas magnéticas es fácil de operar, reactivos simples y adecuado para operaciones automatizadas de alto rendimiento en placas de 96 pocillos o placas de 384 pocillos.
Con el avance de la tecnología, cada vez más fabricantes han desarrollado diferentes kits de extracción de ácido nucleico basados en perlas inmunomagnéticas. Una variedad de modificaciones químicas en la superficie de las perlas magnéticas brindan la posibilidad de realizar experimentos complejos.
Clasificación celular
La clasificación celular es otra aplicación popular de las perlas inmunomagnéticas. Usando perlas inmunomagnéticas combinadas con marcadores en la superficie de las células diana, las células diana de alta pureza se pueden separar de mezclas de células complejas en unos pocos minutos. Las perlas inmunomagnéticas no activarán las células ni afectarán la función y viabilidad de las células, y las funciones fisiológicas de las células no cambiarán, por lo que las células marcadas magnéticamente se pueden usar para análisis y experimentos posteriores de inmediato.
Otro método común para la clasificación de células es FACS. En el caso de clasificación de células individuales, clasificación de células múltiples al mismo tiempo, o clasificación basada en marcadores de células intracelulares (como GFP), el método FACS es más ventajoso. En comparación con FACS, la operación de clasificación de perlas magnéticas es más simple y rápida. Para la clasificación general de células, se puede preferir el método de perlas inmunomagnéticas.
Separación y purificación de anticuerpos
La separación y purificación de anticuerpos tradicionales generalmente utilizan cromatografía, que es engorrosa, requiere mucho tiempo, requiere equipos altos y costos de inversión altos, mientras que la purificación magnética de anticuerpos basada en perlas inmunomagnéticas recubiertas de proteína puede lograr la expresión de productos de anticuerpos monoclonales a través de una simple adsorción magnética. El propósito de separar los anticuerpos monoclonales. En comparación con los métodos de separación tradicionales, las perlas inmunomagnéticas pueden realizar la separación y el enriquecimiento al mismo tiempo, lo que mejora efectivamente la velocidad de separación y la eficiencia del enriquecimiento. Las perlas inmunomagnéticas también pueden realizar automatización y operación masiva, cumplir con los requisitos de operación de alto rendimiento de la biología y tener las características de uso conveniente, operación simple, corto tiempo y bajo costo.
Estimulación celular
Las perlas inmunomagnéticas también juegan un papel importante en la terapia celular. En la activación y expansión de células T y células NK, las perlas inmunomagnéticas acopladas a proteínas o anticuerpos pueden reemplazar a las APC, lo que evita la tediosa operación del procesamiento celular hasta cierto punto. Después de completar la estimulación y activación celular, las perlas magnéticas inmunes se pueden eliminar por completo aplicando un campo magnético. En comparación con la adición directa de anticuerpos o proteínas para la estimulación, se evita la contaminación residual de anticuerpos solubles o mitógenos. La misma perla inmunomagnética se puede acoplar a una variedad de anticuerpos y proteínas requeridos, y el efecto de proximidad puede optimizar en gran medida el efecto de estimulación celular y mejorar la eficiencia de la expansión celular.
Diagnóstico in vitro
El uso de perlas inmunomagnéticas puede combinar las características de las moléculas diana, y sus métodos de aplicación en el diagnóstico in vitro también están aumentando. En primer lugar, se utilizan perlas inmunomagnéticas como sustratos, que se pueden utilizar para capturar muestras. Debido a que las perlas magnéticas tienen buena fluidez y una gran superficie, pueden exponer completamente la proteína ligando y aumentar en gran medida la eficiencia de captura. Al mismo tiempo, el uso de varios métodos de detección como la fluorescencia, la electroquímica o la quimioluminiscencia también aporta mucha libertad al desarrollo de la metodología. Además, las perlas inmunomagnéticas también se pueden usar como marcadores, y las propiedades magnéticas de las perlas magnéticas se pueden usar para obtener señales. Este método generalmente tiene una sensibilidad extremadamente alta, que puede alcanzar fg / ml.