Utilice el método y las precauciones del sistema de extracción de ácido nucleico del método de perlas magnéticas
El sistema de extracción de ácido nucleico es un instrumento que utiliza reactivos de extracción de ácido nucleico coincidentes para completar automáticamente la extracción de ácido nucleico de la muestra. El método de la perla magnética consiste en lisar la muestra de tejido celular a través de la solución de lisis, las moléculas de ácido nucleico libres de la muestra se adsorben específicamente en la superficie de las partículas magnéticas y las impurezas como las proteínas no se adsorben sino que permanecen en la solución. Las perlas magnéticas que transportan ácido nucleico son adsorbidas por una varilla magnética y se mueven a diferentes tanques de reactivos. El ácido nucleico puro se obtiene finalmente mediante agitación rápida repetida y mezclado del líquido, lisis celular, adsorción de ácido nucleico, lavado y elución y otras etapas.
Uso de sistema de extracción de ácido nucleico de perlas magnéticas
Por lo general, hay dos formas de utilizar el sistema de extracción de ácido nucleico del método de perlas magnéticas, a saber, el método de varilla magnética y el método de succión. A continuación explicaremos en detalle las operaciones específicas del método de varilla magnética y el método de succión.
1. Método de varilla magnética
El método de varilla magnética utiliza la transferencia de perlas magnéticas y la inmovilización de líquidos para realizar la separación de ácidos nucleicos. El principio y el proceso son los mismos que los del método de succión. Existe una diferencia en la separación entre perlas magnéticas y líquido. El método de la varilla magnética consiste en separar las perlas magnéticas del líquido residual mediante la adsorción de las perlas magnéticas en la varilla magnética y ponerlas en el líquido en el siguiente paso para realizar la extracción de ácido nucleico.
2. Método de succión
El método de succión también se llama método de pipeteo, que utiliza la transferencia de líquido o la inmovilización de perlas magnéticas para realizar la extracción de ácido nucleico. La transferencia generalmente se realiza mediante la operación del manipulador de control del sistema, y el proceso de extracción es el siguiente:
1) agrietamiento
Agregue el lisado a la muestra, use movimiento mecánico y calentamiento para mezclar la solución de reacción y completar la reacción. Lisar la célula para liberar el ácido nucleico.
2) adsorción
Agregue las perlas magnéticas a la solución de lisis de muestra, mezcle bien y use las perlas magnéticas para tener una fuerte afinidad por los ácidos nucleicos en valores de alto pH y sal. Las perlas magnéticas pueden adsorber ácidos nucleicos. Bajo la acción de un campo magnético externo, separe las perlas magnéticas de la solución. Transfiera la punta al tanque de desechos y deseche la punta.
3) Lavado
Retire el campo magnético externo, use una nueva punta para agregar el tampón de lavado, mezcle bien, elimine las impurezas y elimine el líquido bajo la acción del campo magnético externo.
4) Elución
Retire el campo magnético externo, agregue el tampón de elución con una punta nueva, mezcle bien y el ácido nucleico unido se separe de las perlas magnéticas, de modo que se obtenga el ácido nucleico purificado.
Precauciones
1. El sistema de extracción de ácido nucleico está al menos a 10 cm de otras superficies verticales.
2. El cable de alimentación de entrada del instrumento debe estar conectado a tierra para evitar accidentes por descargas eléctricas.
3. El operador no puede desmontar el instrumento sin autorización y debe tener personal de mantenimiento profesional calificado para completar el reemplazo de componentes o realizar ajustes internos y otras operaciones. Cuando se enciende la alimentación, no reemplace los componentes.
4. La humedad relativa es del 10% al 80%, el aire sin obstrucciones es de 35 ℃ o menos, la presión atmosférica normal (la altitud debe ser inferior a 3000 m), la temperatura de 20-35 ℃ y la temperatura de uso típica de 25 ℃ es la entorno de instalación del instrumento.
5. No coloque el instrumento cerca de una fuente de calor como un calentador eléctrico. Evite salpicar agua u otros líquidos en los componentes electrónicos para evitar cortocircuitos.
6. Tanto la entrada de aire como la salida de aire están ubicadas en la parte posterior del instrumento y, al mismo tiempo, evitan que el polvo o las fibras se acumulen en la entrada de aire y mantienen el conducto de aire sin obstrucciones.
En la actualidad, el extractor de ácido nucleico con método de perlas magnéticas se utiliza ampliamente en varios campos, como la detección de microbios ambientales, la detección de seguridad alimentaria, la seguridad de las transfusiones de sangre, la identificación de medicina forense, el centro de control de enfermedades, el diagnóstico de enfermedades clínicas, la investigación biológica y la cría de animales.