核酸提取磁珠的分类
随着新的冠状病毒的爆发,尽管已得到控制,但每个人仍然不能掉以轻心。每个人都应该知道,所有疑似病例和发烧患者都必须接受核酸检测,以确认它们是否是新的冠状病毒。核酸检测的步骤主要分为三个步骤:
1.采样:从呼吸道或人体其他部位收集可能含有病毒的样品。
2.提取:从样品中提取病毒核酸并将其与其他物质分离。
3.检测:通过荧光定量PCR方法检测提取的病毒含量。
其中,磁珠是核酸提取的必要工具之一。那么用于核酸提取的磁珠的分类和功能是什么?
磁珠的分类和功能:根据表面性质,它们可分为以下三类
1.硅羟基磁珠
这是使用最广泛的磁珠之一。使用硅烷醇磁珠提取核酸时,通常需要高浓度的离液盐(NaI,NaClO4,GuHCI,GuSCN等)。高浓度的盐离子可以有效地屏蔽溶液中的静电排斥。同时,离液盐离子还可以与磁珠和核酸分子的表面竞争结合,破坏两个表面上的原始水合层,并促进磁表面之间的吸附(氢键+范德华力)珠和核酸分子。由于常用的离液盐(例如胍离子)对PCR有抑制作用,因此必须在随后的洗涤步骤中将其除去。去除效果可以通过吸光度比来监控。
2.羧基磁珠
除了能够在高浓度离液盐环境中结合核酸分子外,此类磁珠还可以通过另一种特殊的机制结合核酸分子。通过向溶液中添加一定浓度的PEG和NaCl,核酸分子可以从拉伸的构象逐渐卷曲成小球形,并且其上的大多数负电荷也被屏蔽,从而促进了核酸的吸附酸分子到磁珠。核酸分子的分子量越大,从伸展的线圈到卷曲的球的构象变化就越有可能发生。因此,通过调节盐溶液与核酸样品的体积比,可以在羧基磁珠上获得更大分子量的核酸片段。在表面上的优先吸附实现了所谓的碎片筛选效果。
3.氨基/咪唑基和其他带正电的磁珠
通过调节pH,这样的磁珠可以容易地实现核酸分子在表面上的可逆结合。然而,由于带正电的表面太强地吸附核酸分子,因此容易导致产率低。因此,带正电的磁珠的使用不如硅烷醇和羧基磁珠广泛。
上面详细解释了用于核酸提取的磁珠的分类和功能。 Aisen以纳米生物磁珠为核心,生产核酸提取器及其配套的磁珠核酸提取试剂盒。