磁珠法核酸提取步骤及原理

随着生物医学的不断发展，核酸提取技术也在更新换代，磁珠法核酸提取作为新型核酸提取技术，能够高通量、自动化提取核酸，满足当今生物技术的需要。另外，磁珠法核酸提取的步骤较为简单，操作方便，受到好评。下面，爱森小编为大家分享一下磁珠法核酸提取步骤及原理吧。

磁珠法核酸提取步骤

1、每支40mg规格的蛋白酶K干粉中加入1 mL去离子水至终浓度40mg/mL，每支20mg规格的蛋白酶K干粉中加入500 μL去离子水至终浓度40mg/mL，颠倒混匀十次使其完全溶解，短期使用可于4℃保存，长期储存请置于-20℃，反复冻融不得超过五次。

2、组织样本取10~30 mg液氮研磨至细粉状，转移到1.5 mL离心管中，加入200 μL 1 X PBS缓冲液重悬，然后进行下一步操作。液体样本直接进行下一步操作。

3、取500μL的病毒裂解液VL加到1.5mL的无酶离心管中，然后加入25μL蛋白酶K和25μL的病毒磁珠(加入前摇匀)，再加入200μL的血清/血浆/组织匀浆液样本，涡旋振荡混匀，55%C水浴20min，期间每隔5min颠倒混匀10s。

4、取出水浴的无酶离心管，放置到磁力架上，磁吸90s使磁珠完全吸附，用移液器小心吸弃上清(注意不要吸到管底的磁珠)。

5、从磁力架上取下离心管，加入700μL的漂洗液BufferA ，吹打混匀或者涡旋混匀30s ，使磁珠重悬，然后将离心管放置到磁力架上，磁吸90S使磁珠完全吸附，用移液器小心吸弃上清。

6、取700μL的漂洗液BufferB，加到离心管中，尽量不要吹散磁珠，然后直接吸弃上清。

7、加入80μL的洗脱缓冲液，取下离心管，56℃水浴5min，期间涡旋3-4次，使核酸从磁珠上洗脱下来。

8、把离心管放置到磁力架上磁吸60s，将液体转移至一个新的1.5mL的无酶离心管中，直接进行下游实验或-20℃保存。

磁珠法核酸提取原理

其原理主要依靠静电作用、疏水作用和氢键作用。细胞或组织在裂解液作用下，其中的D NA/RNA被释放出来。此时经过表面修饰的超顺磁性氧化硅纳米磁珠即与核酸进行“特异性结合”，形成“核酸-磁珠复合物”。然后在外加磁场的作用下，复合物即分离出来。然后经过洗脱液洗去非特异性吸附的杂质、去盐、纯化后，即得到欲提取的核酸物质。

上述即是磁珠法核酸提取步骤及原理相关介绍，爱森生物科技生产的磁珠及核酸提取系统性能优异，质量可靠，欢迎有需要的客户致电咨询。