磁珠法核酸提取系统使用方法及注意事项
核酸提取系统是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。磁珠法是通过裂解液裂解细胞组织样本,从样本中游离出来的核酸分子被特异的吸附到磁性颗粒表面,蛋白质等杂质不被吸附而留在溶液中。利用磁棒吸附携带核酸的磁珠移动至不同的试剂槽内,通过反复快速搅拌、混匀液体,经过细胞裂解、核酸吸附、洗涤与洗脱等步骤,最终得到纯净的核酸。
磁珠法核酸提取系统使用
磁珠法核酸提取系统使用方法通常有了两种即磁棒法和抽吸法,下面我们就针对磁棒法和抽吸法的具体操作进行以下详解。
1.磁棒法
磁棒法是利用磁珠的转移,液体的固定来使核酸的分离得以实现。其和抽吸法的原理和过程相同。磁珠和液体分离的方式有差异。磁棒法是通过磁棒对磁珠的吸附从废液中分离开磁珠,在下一步的液体中将其放入,使核酸的提取得以实现。
2.抽吸法
抽吸法又称为移液法,是利用液体的转移或者磁珠的固定来使核酸的提取得以实现的。通常利用对系统控制机械臂的操作来实现转移,有如下提取过程:
1) 裂解
将裂解液加入到样品中,利用机械运动及加热来混匀反应液和使反应充分。裂解细胞,使核酸释放出来。
2) 吸附
将磁珠加入到样品裂解液中,充分混匀,通过磁珠在高盐低PH值下对核酸亲和力很强的特点,对核酸吸附,在外加磁场作用下,分离磁珠与溶液,通过吸头转移到废液槽中,弃掉吸头。
3) 洗涤
将外加磁场撤去,使用新吸头将洗涤缓冲液加入,充分混匀,将杂质去除,在外加磁场作用下,移出液体。
4) 洗脱
将外加磁场撤去,使用新吸头将洗脱缓冲液加入,充分混匀,结合的核酸就和磁珠分离,从而使纯化的核酸获得。
注意事项
1.核酸提取系统至少离其他竖直面10cm。
2.仪器的输入电源线必须接地以防止触电事故。
3.操作人员不可以擅自对仪器进行拆解,必须有持证的专业维修人员完成更换元件或进行机内调节等操作,当接通电源时,不要更换元件。
4.相对湿度10%-80%、畅通流入的空气为35℃或以下,正常的大气压(海拔高度应该低于3000m)、温度20-35℃、典型使用温度25℃为仪器的安装环境。
5.不要在如电暖炉等靠近热源的地方放置仪器应当防止将水或者其他液体溅入电子元件中以避免短路。
6.进风口和排风口均在仪器背面的位置,同时同时防止在进风口聚集灰尘或纤维,风道保持畅通。
目前磁珠法核酸提取仪在环境微生物检测、食品安全检测、输血安全、法医学鉴定、疾病控制中心、临床疾病诊断、生物学研究以及畜牧业等多种领域得到广泛地应用。